无选择标记和载体骨干序列的Xa21转基因水稻的获得 |
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引用本文: | 夏志辉,李晓兵,陈彩艳,范海阔,江光怀,朱立煌,翟文学.无选择标记和载体骨干序列的Xa21转基因水稻的获得[J].生物工程学报,2006,22(2). |
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作者姓名: | 夏志辉 李晓兵 陈彩艳 范海阔 江光怀 朱立煌 翟文学 |
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作者单位: | 中国科学院遗传与发育生物学研究所,北京 100101 |
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摘 要: | 利用双右边界T-DNA载体通过根癌农杆菌介导法将水稻白叶枯病广谱抗性基因Xa21导入杂交稻重要恢复系C418中。T0代共获得27个独立转基因株系,通过田间抗性鉴定与PCR分析,有17个株系的Xa21基因分子鉴定为阳性,且对白叶枯病原菌P6生理小种具有抗性。通过对17个株系的后代植株进行田间抗性鉴定,分子标记辅助选择及Southern杂交分析,结果显示4个株系的T1代植株中能分离出无潮霉素标记基因的Xa21转基因植株。无选择标记Xa21转基因株系的获得率为15%。PCR检测还表明,这些无选择标记的Xa21转基因植株不带有载体骨架序列。通过对转基因后代进一步的抗性鉴定与PCR辅助选择,获得了无选择标记和载体骨架序列的转基因Xa21纯合的抗白叶枯病水稻。
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关 键 词: | 转基因水稻 Xa21 白叶枯病抗性 无选择标记 无载体骨干 双右边界T-DNA载体 |
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