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| 黑曲霉N14植酸酶基因在巴斯德毕赤酵母中的高效表达 | |
| 引用本文： | 彭远义, 刘生峰, 李春明, 周泽扬,.黑曲霉N14植酸酶基因在巴斯德毕赤酵母中的高效表达[J].生物工程学报,2004,20(6):967-971. |
| 作者姓名： | 彭远义 刘生峰 李春明 周泽扬 |
| 作者单位： | 1. 西南农业大学重庆市蚕桑学重点实验室微生物中心,重庆,400716;西南农业大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室,重庆,400716 2. 西南农业大学动物科技学院重庆市牧草与草食家畜重点实验室,重庆,400716 3. 西南农业大学重庆市蚕桑学重点实验室微生物中心,重庆,400716 |
| 基金项目： | 重庆市科委攻关项目 (No .2 0 0 1675 5 )基金资助~~ |
| 摘 要： | 从黑曲霉N14基因组DNA中扩增出植酸酶phyA基因表达片段 ,并将其克隆到pMD18-T载体中。以此片段构建了pPIC9K-phyA重组表达载体 ,目的片段以正确的阅读框架插入到pPIC9K的多克隆位点EcoRⅠ和NotⅠ之间。重组表达载体经XbaⅠ线性化处理 ,电击转化毕赤酵母 ,经G418抗性筛选、酶活性测定、PCR鉴定和SDS-PAGE分析 ,获得了两株产酶活性分别为 14 39583u mL发酵液 (PP N1422 )和14 89083u/mL发酵液 (PP-N1444)的高产工程菌 ,其酶活性分别是出发菌株酶活性 (422u/mL)的 34113倍和 35286倍 ,重组酵母具有很好的遗传稳定性。重组植酸酶在pH值 2.5～3.0和 5.0～5.5时酶活性最高 ,且在pH4.5～6.5之间均有相当高的酶活性 ,最适作用温度为55℃。 |
| 关 键 词： | 黑曲霉N14 植酸酶 phyA基因 毕赤酵母 |
| 文章编号： | 1000-3061(2004)06-0967-05 |
| 修稿时间： | 2004年4月1日 |
Over-expression of Aspergillus niger N14 Phytase Gene in Pichia pastoris |
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| PENG Yuan-Yi , LIU Sheng-Feng LI Chun-Ming ZHOU Ze-Yang.Over-expression of Aspergillus niger N14 Phytase Gene in Pichia pastoris[J].Chinese Journal of Biotechnology,2004,20(6):967-971. | |
| Authors: | PENG Yuan-Yi LIU Sheng-Feng LI Chun-Ming ZHOU Ze-Yang |
| Institution: | PENG Yuan-Yi 1,2* LIU Sheng-Feng 2 LI Chun-Ming 2 ZHOU Ze-Yang 1* 1 |
| Abstract: | |
| Keywords: | Aspergillus niger N14 phytase phyA gene Pichia pastoris |
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