植酸酶phyAm基因结构延伸突变改善酶的热稳定性 |
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引用本文: | 陈惠,王红宁,杨婉身,赵海霞,吴琦,单志.植酸酶phyAm基因结构延伸突变改善酶的热稳定性[J].生物工程学报,2005,21(6). |
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作者姓名: | 陈惠 王红宁 杨婉身 赵海霞 吴琦 单志 |
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作者单位: | 1.四川农业大学生命科学院,雅安 625014;2.四川农业大学动物科技学院,雅安 625014 |
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摘 要: | 将来源于黑曲霉N25的植酸酶基因phyAm重组于大肠杆菌表达载体pET30b(+),以重组表达载体pET30b-F-phyAm为模板经PCR扩增获得结构延伸突变植酸酶基因phyAe(在植酸酶基因C端增加了来源于pET-30b-F-phyAm载体上13氨基酸残基)。含突变基因的重组表达载体pPIC9k-phyAe在GS115酵母中表达。纯化的突变酶PP-NP-e与野生型酶PP-NP-m8相比:PP-NPAe的最适反应温度上升了3℃,75℃处理10min,热稳定性提高21%,比活力略有提高。最适反应pH为5.6,有效pH范围pH4.6到pH6.6。比未突变酶扩大了0.4单位。
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关 键 词: | 植酸酶, 延伸突变, 毕赤酵母, 热稳定性 最适反应pH |
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