| 基于胶体金的8-羟基-2′-脱氧鸟苷免疫层析试纸条北大核心CSCD |
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| 引用本文： | 叶伟伟,王丽文,张宇,李潮锋,钱天润,付贤树,张明洲,单继宏.基于胶体金的8-羟基-2′-脱氧鸟苷免疫层析试纸条北大核心CSCD[J].生物工程学报,2022,38(3):1197-1208. |
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| 作者姓名： | 叶伟伟 王丽文 张宇 李潮锋 钱天润 付贤树 张明洲 单继宏 |
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| 作者单位： | 浙江工业大学 机械工程学院, 浙江 杭州 310014;浙江工业大学 食品科学与工程学院, 浙江 杭州 310014;中国计量大学 生命科学学院, 浙江 杭州 3100184;浙江省生物计量及检验检疫技术重点实验室, 浙江 杭州 310018 |
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| 基金项目： | 浙江省自然科学基金(LY20D060008)；浙江省科技计划项目-公益技术(LGG19F010008)；宁波市公益类科技计划项目(20211JCGY020387) |
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| 摘 要： | 8-羟基-2′-脱氧鸟苷(8-hydroxy-2′-deoxyguanosine,8-OHdG)是评价DNA氧化损伤较灵敏和稳定的生物标志物。文中采用竞争法建立一种快速、灵敏检测8-OHdG的胶体金免疫层析试纸条。将样品垫(玻璃纤维素膜)、结合垫(玻璃纤维素膜)、硝酸纤维素膜和吸水垫依此粘贴在聚氯乙烯(polyvinyl chloride,PVC)底板上,构建试纸条。通过柠檬酸钠还原三水合四氯金酸制备胶体金(gold nanoparticles,AuNPs),8-OHdG配对的抗体(antibody,Ab)包被于AuNPs的外层(Ab coated AuNPs,Ab@AuNPs)作为探针。牛血清蛋白(bovine serum protein,BSA)与8-OHdG用碳二亚胺盐酸盐偶联制备人工抗原,作为检测线的包被抗原。羊抗鼠多抗(imunoglobulin G,IgG)作为质控线的包被抗体。对试纸条的硝酸纤维素膜、上样液的配方、金标抗体喷涂量等实验参数进行了优化。结果表明,硝酸纤维素膜(nitrocellulose film,NC)膜采用CN 95,上样液的最优配方为1%BSA+3%吐温-20+3%蔗糖+0.9%NaCl溶液,最适金标抗体喷涂量为4μL。利用试纸条在可见光下检测8-OHdG,根据检测线(test line,T线)和质控线(control line,C线)的显色强度对比,可初步判断尿液中8-OHdG的含量水平。并通过T线的灰度值计算尿液中的8-OHdG的浓度,检测限为2.55μg/L。该方法简单、快速且有较好的特异性,可检测人体尿液中的8-OHdG含量,以初步评价人体的健康状态。
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| 关 键 词： | 免疫层析 胶体金 8-羟基-2′-脱氧鸟苷 试纸 |
| 收稿时间： | 2021/5/25 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2021/10/18 0:00:00 |
Development of a colloidal gold based immunochromatographic strip for 8-OHdG detection |
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| YE Weiwei,WANG Liwen,ZHANG Yu,LI Chaofeng,QIAN Tianrun,FU Xianshu,ZHANG Mingzhou,SHAN Jihong.Development of a colloidal gold based immunochromatographic strip for 8-OHdG detection[J].Chinese Journal of Biotechnology,2022,38(3):1197-1208. |
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| Authors: | YE Weiwei WANG Liwen ZHANG Yu LI Chaofeng QIAN Tianrun FU Xianshu ZHANG Mingzhou SHAN Jihong |
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| Institution: | College of Mechanical Engineering, Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014, Zhejiang, China;College of Food Science and Technology, Zhejiang University of Technology, Hangzhou 310014, Zhejiang, China;College of Life Sciences, China Jiliang University, Hangzhou 310018, Zhejiang, China;Zhejiang Provincial Key Laboratory of Biometrology and Inspection & Quarantine, Hangzhou 310018, Zhejiang, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | immunochromatography colloidal gold 8-OHdG strip |
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