| HBD-3基因的乳腺特异性表达载体的构建及真核表达 |
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| 引用本文： | 彭巍,兰志刚,马晶晶,王保垒,张涌.HBD-3基因的乳腺特异性表达载体的构建及真核表达[J].生物工程学报,2009,25(7):968-974. |
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| 作者姓名： | 彭巍 兰志刚 马晶晶 王保垒 张涌 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学动物医学院生物工程研究所,杨凌,712100 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2004AA213072)资助~~ |
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| 摘 要： | 为了制备高效表达人β-防御素-3基因的转基因奶牛提供可靠的核移植供体细胞,本试验采用RT-PCR从人胎盘组织获得人β-防御素3cDNA,通过双酶切法将目的基因片段hBD插入到质粒pBCP之间,最后再通过双酶切法将目的片段BCD插入到真核表达载体pEGFP-C1中,最终构建乳腺特异性表达载体pEBCD。脂质体介导法转染奶牛胎儿成纤维细胞G418,抗性筛选3~4周后,经PCR、RT-PCR扩增检测和报告基因EGFP表达检测,得到稳定整合外源基因的转基因供体细胞;同时检测稳定转染的奶牛乳腺上皮细胞系的上清液,检测到重组人β-防御素-3蛋白可以在奶牛乳腺上皮细胞组织特异性表达。
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| 关 键 词： | 人β-防御素 3 奶牛β-酪蛋白 EGFP 报告基因 供体细胞 核移植 |
| 收稿时间： | 3/3/2009 12:00:00 AM |
Construction of HBD-3 gene mammary-specific expression vector and eukaryotic expression |
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| Wei Peng,Zhigang Lan,Jingjing M,Baolei Wang and Yong Zhang.Construction of HBD-3 gene mammary-specific expression vector and eukaryotic expression[J].Chinese Journal of Biotechnology,2009,25(7):968-974. |
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| Authors: | Wei Peng Zhigang Lan Jingjing M Baolei Wang and Yong Zhang |
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| Institution: | Institute of Biotechnology, College of Animal Veterinary Medicine, Northwest Agiculture and Forestry University, Yangling 712100, China;Institute of Biotechnology, College of Animal Veterinary Medicine, Northwest Agiculture and Forestry University, Yangling 712100, China;Institute of Biotechnology, College of Animal Veterinary Medicine, Northwest Agiculture and Forestry University, Yangling 712100, China;Institute of Biotechnology, College of Animal Veterinary Medicine, Northwest Agiculture and Forestry University, Yangling 712100, China;Institute of Biotechnology, College of Animal Veterinary Medicine, Northwest Agiculture and Forestry University, Yangling 712100, China |
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