| 人工合成的黑曲霉NRRL3135菌株植酸酶基因在毕赤酵母系统中的高效表达 |
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| 引用本文： | 贝锦龙,陈庄,杨林,廖玲,王棻章,蒋宗勇.人工合成的黑曲霉NRRL3135菌株植酸酶基因在毕赤酵母系统中的高效表达[J].生物工程学报,2001,17(3). |
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| 作者姓名： | 贝锦龙 陈庄 杨林 廖玲 王棻章 蒋宗勇 |
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| 作者单位： | 1. 中山大学
2. 广东省农业科学院畜牧研究所 |
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| 基金项目： | 广东省自然科学基金，广东省科技厅科技计划 |
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| 摘 要： | 本文以黑曲霉(Aspergillus niger)NRRL3135菌株植酸酶基因为对象，通过基因人工合成的方法去除了该基因的内含子与信号肽编码序列，换用在毕赤酵母(Pichia pastoris)中使用频率较高的密码子以优化其表达。该人工合成植酸酶基因(PhyA-as)以N端融合的方式正确插入到毕赤酵母表达载体pPICZαA。通过电击将重组表达载体整合入酵母染色体DNA中得到重组转化子。SDSPAGE结果与表达产物酶学性质研究表明植酸酶得到分泌表达，且与天然产物性质基本一致。筛选得若干株高产基因工程菌，其中SPANⅢ菌株达到了在摇床培养条件下，每毫升发酵液产生165000u植酸酶的水平，基本满足工业化生产的要求。
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| 关 键 词： | 基因人工合成， 植酸酶基因phyA-as 基因克隆，毕赤酵母表达系统 |
Overexpression of Artificial Synthetic Gene of Aspergillus niger NRRL3135 Phytase in Pichia pastoris |
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