| 家蚕蛋白酪氨酸磷酸酶基因克隆、表达纯化与结构分析 |
| |
| 引用本文： | 何华伟,王叶菁,宋凯,王姣,位曙光,赵朋,赵萍.家蚕蛋白酪氨酸磷酸酶基因克隆、表达纯化与结构分析[J].生物工程学报,2017,33(11):1827-1839. |
| |
| 作者姓名： | 何华伟 王叶菁 宋凯 王姣 位曙光 赵朋 赵萍 |
| |
| 作者单位： | 1 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400715；2 西南大学生物技术学院，重庆 400715,1 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400715；2 西南大学生物技术学院，重庆 400715,1 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400715,2 西南大学生物技术学院，重庆 400715,1 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400715,1 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400715,1 西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室，重庆 400715 |
| |
| 基金项目： | 国家自然科学基金项目 (Nos. 31402139, 31572465)，国家自然科学基金重点项目 (No. 31530071)，重庆市基础科学与前沿技术研究专项 (Nos. cstc2015jcyjA00040, cstc2015jcyjBX0035)，中央高校基本科研业务费 (No. XDJK2013A019)，西南大学博士基金 (No. SWU112111) 资助。 |
| |
| 摘 要： | 蛋白酪氨酸磷酸酶(Protein tyrosine phosphatase,PTP,EC 3.1.3.48)特异性地催化去除磷酸化修饰的酪氨酸残基上的磷酸基团,导致蛋白去磷酸化,从而调控了细胞生长、增殖、分化和免疫等生命活动。家蚕Bombyx mori蛋白酪氨酸磷酸酶h(BmPTP-h)参与了核型多角体病毒(Nucleopolyhedrovirus,NPV)在家蚕体内的复制过程,但目前对于BmPTP-h结构和性质的了解并不多。本文从家蚕中肠克隆了BmPTP-h基因编码序列,分析了BmPTP-h的基因组结构、mRNA结构、序列特征、二级结构和溶液中的状态。同源氨基酸序列比对分析表明BmPTP-h与多种昆虫NPV的PTP序列具有高相似度,暗示了它们可能具有共同的起源和相似的功能。文中构建了原核表达载体,通过大肠杆菌在25℃下表达获得了可溶性的重组BmPTP-h,利用Ni-NTA亲和层析纯化了BmPTP-h。凝胶过滤分析显示BmPTP-h在溶液中可以形成聚集体和单体。圆二色光谱分析显示重组的BmPTP-h包含α螺旋结构,升高温度导致BmPTP-h的α螺旋结构去折叠,α螺旋结构含量下降。这些研究为深入研究BmPTP-h的结构和调控机理提供了基础。
|
| 关 键 词： | 家蚕，蛋白酪氨酸磷酸酶，克隆，表达纯化，结构 |
| 收稿时间： | 2017/2/14 0:00:00 |
Cloning, expression, purification and structure analysis of protein tyrosine phosphatase of Bombyx mori |
| |
| Huawei He,Yejing Wang,Kai Song,Jiao Wang,Shuguang Wei,Peng Zhao and Ping Zhao.Cloning, expression, purification and structure analysis of protein tyrosine phosphatase of Bombyx mori[J].Chinese Journal of Biotechnology,2017,33(11):1827-1839. |
| |
| Authors: | Huawei He Yejing Wang Kai Song Jiao Wang Shuguang Wei Peng Zhao and Ping Zhao |
| |
| Institution: | 1 State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400715, China;2 College of Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715, China,1 State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400715, China;2 College of Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715, China,1 State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400715, China,2 College of Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715, China,1 State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400715, China,1 State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400715, China and 1 State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, Southwest University, Chongqing 400715, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | Bombyx mori protein tyrosine phosphatase cloning expression and purification structure |
| 本文献已被 CNKI 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《生物工程学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《生物工程学报》下载免费的PDF全文 |
|
