| 枯草芽孢杆菌SCK6超级感受态的制备和转化条件优化 |
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| 引用本文： | 李信志,卢争辉,周玉玲,李世宇,张桂敏.枯草芽孢杆菌SCK6超级感受态的制备和转化条件优化[J].生物工程学报,2017,33(4):692-698. |
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| 作者姓名： | 李信志 卢争辉 周玉玲 李世宇 张桂敏 |
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| 作者单位： | 湖北大学 生命科学学院 生物资源绿色转化湖北省协同创新中心，湖北 武汉 430062,湖北大学 生命科学学院 生物资源绿色转化湖北省协同创新中心，湖北 武汉 430062,湖北大学 生命科学学院 生物资源绿色转化湖北省协同创新中心，湖北 武汉 430062,湖北大学 生命科学学院 生物资源绿色转化湖北省协同创新中心，湖北 武汉 430062,湖北大学 生命科学学院 生物资源绿色转化湖北省协同创新中心，湖北 武汉 430062 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金 (No. 31670069)，国家高技术研究发展计划 (863计划) (No. 2014AA021303-04) 资助。 |
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| 摘 要： | 枯草芽孢杆菌是一种革兰氏阳性好氧细菌,因其安全性和高分泌特性,已被广泛用作异源蛋白的表达宿主。然而,相比大肠杆菌,枯草芽孢杆菌的转化效率低,限制了其作为宿主的异源蛋白的定向进化。本文通过改变培养基、诱导剂浓度、质粒类型等参数优化感受态制备的条件,利用常规质粒进行转化,结果表明,用营养丰富的YN培养基替代常规LB培养基制备感受态,可以使转化效率提高4倍左右;加入1.5%的木糖诱导2 h,感受态的转化效率又提高2倍左右;用大肠杆菌Escherichia coli GM272来源的质粒又可进一步提高转化效率3倍左右。综合最优条件制备SCK6的感受态,转化整合型质粒pDG1730,效率可以达到10~6 CFU/μg,相对未优化的条件提高了2个数量级,为基于枯草芽孢杆菌的酶的定向进化和代谢工程奠定了基础。
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| 关 键 词： | 枯草芽孢杆菌，ComK基因，木糖，感受态，pDG1730 |
| 收稿时间： | 2016/9/28 0:00:00 |
Preparation and transformation optimization for supercompetent B. subtilis SCK6 cells |
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| Xinzhi Li,Zhenghui Lu,Yuling Zhou,Shiyu Li and Guimin Zhang.Preparation and transformation optimization for supercompetent B. subtilis SCK6 cells[J].Chinese Journal of Biotechnology,2017,33(4):692-698. |
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| Authors: | Xinzhi Li Zhenghui Lu Yuling Zhou Shiyu Li and Guimin Zhang |
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| Institution: | Bioresources Green Transformation Collaborative Innovation Center of Hubei Province, College of Life Sciences, Hubei University, Wuhan 430062, Hubei, China,Bioresources Green Transformation Collaborative Innovation Center of Hubei Province, College of Life Sciences, Hubei University, Wuhan 430062, Hubei, China,Bioresources Green Transformation Collaborative Innovation Center of Hubei Province, College of Life Sciences, Hubei University, Wuhan 430062, Hubei, China,Bioresources Green Transformation Collaborative Innovation Center of Hubei Province, College of Life Sciences, Hubei University, Wuhan 430062, Hubei, China and Bioresources Green Transformation Collaborative Innovation Center of Hubei Province, College of Life Sciences, Hubei University, Wuhan 430062, Hubei, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Bacillus subtilis ComK gene xylose competent cells pDG1730 |
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