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人源性抗HBsAg抗体Fab段在酵母中的表达
引用本文:邓宁,粟宽源,王珣章,龙綮新,杨林,余宙耀.人源性抗HBsAg抗体Fab段在酵母中的表达[J].生物工程学报,2002,18(5):546-550.
作者姓名:邓宁  粟宽源  王珣章  龙綮新  杨林  余宙耀
作者单位:1. 中山大学生物防治国家重点实验室、生物医药中心,广州,510175
2. 解放军第458医院传染病研究中心,广州,510602
基金项目:广州市科委重点攻关项目资助 (No .97 Z 6 5 0 5 )~~
摘    要:通过分步整合的方式,将人源性抗乙肝表面抗原(HBsAg)抗体Fab的轻、重链基因分步整合到巴斯德毕赤(Pichia pastoris)酵母GS115菌株的染色体上,经甲醇诱导,成功地分泌表达出抗HBsAg抗体的Fab片段,表达量达50~80mg/L。ELISA结果显示重组酵母分泌表达出的Fab具有较强的结合HBsAg的能力。通过抗Fab的抗体柱亲和层析,纯化出了纯度较高的Fab产品。

关 键 词:人源性Fab,  分泌表达,  亲和纯化,  巴斯德毕赤酵母
文章编号:1000-3061(2002)05-0546-05
修稿时间:2002年4月8日

The Expression of Humanized Fab Fragment of the Anti-HBsAg Antibody in Methylotropic Yeast Pichia pastoris
DENG Ning,SU Kuan-Yuan,WANG Xun-Zhang,LONG Qing-Xin,YANG Lin,YU Zhou-Yao.The Expression of Humanized Fab Fragment of the Anti-HBsAg Antibody in Methylotropic Yeast Pichia pastoris[J].Chinese Journal of Biotechnology,2002,18(5):546-550.
Authors:DENG Ning  SU Kuan-Yuan  WANG Xun-Zhang  LONG Qing-Xin  YANG Lin  YU Zhou-Yao
Institution:State Key Laboratory for Biological Control, Biopharmaceutical Center in Zhongshan University, Guangzhou 510275, China.
Abstract:Using of two-step integrating technology, transducted the H and L chain gene of humanized Fab fragment of anti-HB-sAg antibody into the genome of methylotropic yeast P. pastoris. Constructed a engineering yeast to produce humanized Fab fragment of the anti-HBsAg antibody. The Fab fragment was efficiently secreted into the medium at a concentration of 50-80 mg/L. The Fab fragment was purified from culturing supernatant of the recombinant yeas by affinity chromatography. The ELISA analysis showed the high affinity of the expressed humanized Fab fragment to the HBsAg.
Keywords:humanized Fab  secreting expression  affinity purification  Pichia pastoris
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