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农杆菌介导的墨兰遗传转化
引用本文:谢利,王芬,曾瑞珍,郭和蓉,周玉亮,张志胜.农杆菌介导的墨兰遗传转化[J].生物工程学报,2015,31(4):542-551.
作者姓名:谢利  王芬  曾瑞珍  郭和蓉  周玉亮  张志胜
作者单位:华南农业大学 广东省植物分子育种重点实验室,广东 广州 510642,华南农业大学 广东省植物分子育种重点实验室,广东 广州 510642,华南农业大学 广东省植物分子育种重点实验室,广东 广州 510642,华南农业大学 广东省植物分子育种重点实验室,广东 广州 510642,华南农业大学 广东省植物分子育种重点实验室,广东 广州 510642,华南农业大学 广东省植物分子育种重点实验室,广东 广州 510642
基金项目:广东省农业科技攻关项目 (No. 2007A020300009-3),广东省教育部产学研项目 (No. 2012B091100480) 资助。
摘    要:转基因育种是快速定向改良兰花育种目标性状的有效方法,但迄今未见有关墨兰转基因育种的研究报道。试验以‘企剑白墨’墨兰Cymbidium sinensis cv.‘Qijianbaimo’的根状茎为受体材料,研究了影响农杆菌介导墨兰遗传转化效率的因素,以建立有实用价值的墨兰遗传转化技术体系。结果表明,受体的预培养时间、乙酰丁香酮的添加方式及浓度、农杆菌工程菌液浓度(OD600)、侵染时间和共培养时间均对‘企剑白墨’根状茎的GUS瞬时表达率有显著影响。以预培养39 d的根状茎尖为材料,在添加200μmol/L乙酰丁香酮,OD600为0.9的工程菌液中侵染35 min后,转入添加200μmol/L乙酰丁香酮的共培养基中培养7 d时,‘企剑白墨’根状茎的GUS瞬时表达率最高,为11.67%。采用上述条件对‘企剑白墨’墨兰进行遗传转化,经PCR鉴定和GUS染色检测,从400株再生植株中获得了3株转基因植株,转化率为0.75%。研究表明通过农杆菌介导法对墨兰进行遗传改良是可行的。

关 键 词:墨兰  农杆菌介导  遗传转化  根状茎
收稿时间:7/7/2014 12:00:00 AM

Agrobacterium-mediated transformation of Cymbidium sinensis
Li Xie,Fen Wang,Ruizhen Zeng,Herong Guo,Yuliang Zhou and Zhisheng Zhang.Agrobacterium-mediated transformation of Cymbidium sinensis[J].Chinese Journal of Biotechnology,2015,31(4):542-551.
Authors:Li Xie  Fen Wang  Ruizhen Zeng  Herong Guo  Yuliang Zhou and Zhisheng Zhang
Institution:Guangdong Provincial Key Laboratory of Plant Molecular Breeding, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China,Guangdong Provincial Key Laboratory of Plant Molecular Breeding, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China,Guangdong Provincial Key Laboratory of Plant Molecular Breeding, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China,Guangdong Provincial Key Laboratory of Plant Molecular Breeding, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China,Guangdong Provincial Key Laboratory of Plant Molecular Breeding, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China and Guangdong Provincial Key Laboratory of Plant Molecular Breeding, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, Guangdong, China
Abstract:
Keywords:Cymbidium sinense  Agrobacterium-mediated  genetic transformation  rhizome
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