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叉孢苏铁ISSR反应条件的优化及初步应用
引用本文:马永,李楠,钟业聪,陆照甫,林鉴钊,蒋明,林平义,罗斌.叉孢苏铁ISSR反应条件的优化及初步应用[J].亚热带植物科学,2005,34(1):10-13.
作者姓名:马永  李楠  钟业聪  陆照甫  林鉴钊  蒋明  林平义  罗斌
作者单位:1. 深圳市仙湖植物园管理处,广东,深圳,5180004;广西大学,农学院,广西,南宁,530005
2. 深圳市仙湖植物园管理处,广东,深圳,5180004
3. 广西林业勘测设计院,广西,南宁,530011
4. 广西百色林业局,广西,百色,533000
5. 广西大学,农学院,广西,南宁,530005
基金项目:深圳市科技局资助项目(98001),国家自然科学基金项目(30060038)资助
摘    要:利用ISSR 技术对叉孢苏铁(Cycas segmentifida)遗传多样性进行研究,对影响PCR 反应的DNA 模板浓度、dNTP 浓度、Taq 酶含量、引物浓度、Mg2 浓度和退火温度等进行了条件优化。叉孢苏铁的ISSR 最佳反应扩增体系为20μl 反应体积2μl 10 ×PCR buffer,模板DNA20ng,1UTaq 酶,1.5~2.75mmol/L MgCl2,0.1mmol/L 4 ×dNTP,0.22μmol/L 引物,2%甲酰胺。适宜的退火温度为50~52℃。从103 条引物中筛选出12 条用于所有样品的扩增,共扩增出122 条带,其中多态性条带为86 条,占总条带数的70.49%。POPGENE分析结果表明,种级水平上,叉孢苏铁具有中等稍高的遗传多样性水平,且各居群间有着很高的遗传分化度。

关 键 词:叉孢苏铁  ISSR  条件优化  初步应用
文章编号:1009-7791(2005)01-0010-04
修稿时间:2004年10月10

Optimization and Preliminary Application of ISSR-PCR Amplification for Cycas segmentifida
MA Yong,LI Nan,ZHONG Ye-cong,LU Zhao-fu,LIN Jian-zhao,HANG Ming,LIN Ping-yi,LUO Bin.Optimization and Preliminary Application of ISSR-PCR Amplification for Cycas segmentifida[J].Subtropical Plant Science,2005,34(1):10-13.
Authors:MA Yong  LI Nan  ZHONG Ye-cong  LU Zhao-fu  LIN Jian-zhao  HANG Ming  LIN Ping-yi  LUO Bin
Institution:MA Yong1,2,LI Nan1,ZHONG Ye-cong3,LU Zhao-fu4,LIN Jian-zhao,JIANG Ming1,LIN Ping-yi1,LUO Bin1 2
Abstract:
Keywords:Cycas segmentifida  ISSR  optimization  preliminary application
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