| Qβ RNA 复制酶中亚基的共表达对β亚基溶解性的影响 |
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| 引用本文： | 王栋.Qβ RNA 复制酶中亚基的共表达对β亚基溶解性的影响[J].微生物学报,2004,44(6):780-784. |
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| 作者姓名： | 王栋 |
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| 作者单位： | 江南大学生物工程学院,工业生物技术教育部重点实验室,无锡,214036 |
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| 摘 要： | 在体外RNA和蛋白质合成及自复制系统的研究中 ,QβRNA复制酶作为以RNA为模板的RNA聚合酶 ,是比较重要的应用酶种之一。该酶由 4个亚基组成 ,其中只有 β亚基是由病毒基因编码 ,而其他 3个亚基都是宿主蛋白。利用普通表达载体合成Qβ复制酶时 ,得到的 β亚基几乎都是不溶性蛋白 ,从而影响了Qβ复制酶的活性和产率。为尝试提高 β亚基的溶解性 ,构建含有β亚基基因的表达质粒pBAD 33 rep ,同时利用pET2 1a( )为表达载体表达其他 3个亚基进行共表达研究。不同亚基组合的共表达结果通过SDS PAGE分析表明 ,当 β亚基与EF Tu Ts亚基共表达时 ,溶解度有一定的提高 ,而且可溶性部分也具有复制酶活性。通过调节共表达诱导物浓度 ,相对增强可溶性 β亚基的表达 ,可溶性Qβ复制酶酶量得到相应的提高
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| 关 键 词： | Qβ复制酶 共表达 β亚基 溶解性 |
| 文章编号： | 0001-6209(2004)06-0780-05 |
| 修稿时间： | 2004年4月26日 |
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