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柔嫩艾美耳球虫孢子发育阶段虫体抑制性消减文库的构建
引用本文:韩红玉,林矫矫,赵其平,董辉,姜连连,王鑫,韩静芳,黄兵.柔嫩艾美耳球虫孢子发育阶段虫体抑制性消减文库的构建[J].微生物学报,2007,23(6).
作者姓名:韩红玉  林矫矫  赵其平  董辉  姜连连  王鑫  韩静芳  黄兵
作者单位:中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232
基金项目:国家自然科技资源共享平台项目(No. 2005DKA21205-4)和国家高技术研究发展计划(863)(No. 2006AA10A207-1)资助。
摘    要:为了分离鉴定柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)孢子发育阶段虫体的差异表达基因,分别以柔嫩艾美耳球虫未孢子化卵囊和孢子化卵囊为驱动组、子孢子为实验组,或未孢子化卵囊为驱动组、孢子化卵囊为实验组,利用抑制性消减杂交(SSH)技术,构建了2个子孢子cDNA消减文库和1个孢子化卵囊cDNA消减文库。随机从3个cDNA消减文库中分别挑取50个克隆,经PCR鉴定2个子孢子cDNA消减文库的重组率都为96%,孢子化卵囊cDNA消减文库的重组率为98%。从每个文库中随机挑取50个克隆测序,并进行同源性比较分析,结果显示:从孢子化卵囊cDNA消减文库中获得了13个单一有效序列,其中8个EST与已知蛋白同源性很高;从2个子孢子cDNA消减文库中共获得了40个单一有效序列,其中9个EST与已知蛋白同源,其余可能为柔嫩艾美耳球虫的新基因。这些结果为分离柔嫩艾美耳球虫新功能基因和进一步探索防治球虫病的方法提供了理论基础。

关 键 词:柔嫩艾美耳球虫,  未孢子化卵囊,  孢子化卵囊,  子孢子,  抑制性消减杂交

Construction of Subtractive cDNA Libraries of the Sporogony Stage of Eimeria tenella by Suppression Subtractive Hybridization
HAN Hong-Yu,LIN Jiao-Jiao,ZHAO Qi-Ping,DONG Hui,JIANG Lian-Lian,WANG Xin,HAN Jing-Fang and HUANG Bing.Construction of Subtractive cDNA Libraries of the Sporogony Stage of Eimeria tenella by Suppression Subtractive Hybridization[J].Acta Microbiologica Sinica,2007,23(6).
Authors:HAN Hong-Yu  LIN Jiao-Jiao  ZHAO Qi-Ping  DONG Hui  JIANG Lian-Lian  WANG Xin  HAN Jing-Fang and HUANG Bing
Abstract:
Keywords:
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