高山被孢霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆、结构分析及其功能的研究 |
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引用本文: | 李明春,刘莉,胡国武,邢来君.高山被孢霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆、结构分析及其功能的研究[J].微生物学报,2003,43(2):220-227. |
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作者姓名: | 李明春 刘莉 胡国武 邢来君 |
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作者单位: | 南开大学微生物系 天津300071
(李明春,刘莉,胡国武),南开大学微生物系 天津300071(邢来君) |
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基金项目: | 国家自然科学基金 (3 9870 0 2 0 ),教育部高等学校骨干教师资助计划项目~~ |
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摘 要: | 从高山被孢霉ATCC1 62 66总DNA中扩增出大小为 1 374bp和 1 947bp的两条特异片段 ,序列分析表明后者在细胞色素b5和组氨酸Ⅰ之间含有一大小为 5 73bp的内含子和两条分别为 1 97bp和 82 8bp的外显子。推导的氨基酸二级结构分析表明 ,该基因有两个长的跨膜疏水区和 3个组氨酸保守区。分别根据D6D内含子及组氨酸Ⅱ区、Ⅲ区的序列设计引物 ,制备不同的探针与高山被孢霉的基因组杂交 ,证明在其基因组中确实存在两个Δ6 脂肪酸脱氢酶基因 ,其中一个基因含有内含子。把不含有内含子的核基因MAGL6 1克隆到的酿酒酵母表达载体pYES2 0中 ,转化到酿酒酵母INVSc1中。对筛选得到的酵母工程菌株进行脂肪酸GC分析 ,检测到了γ 亚麻酸 ,说明克隆的D6D基因MAGL6 1能在酿酒酵母中进行功能性表达。
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关 键 词: | 高山被孢霉 Δ6脂肪酸脱氢酶基因 基因组 内含子 |
文章编号: | 0001-6209(2003)02-0220-08 |
修稿时间: | 2002年8月9日 |
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