苏云金芽胞杆菌rocE基因的转录调控 |
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引用本文: | 赵欣,张梁威,宋福平,张杰,李晶,彭琦.苏云金芽胞杆菌rocE基因的转录调控[J].微生物学报,2021,61(5):1222-1232. |
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作者姓名: | 赵欣 张梁威 宋福平 张杰 李晶 彭琦 |
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作者单位: | 东北农业大学生命科学学院, 黑龙江 哈尔滨 150030;中国农业科学院植物保护研究所, 植物病虫害生物学国家重点实验室, 北京 100193 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(31772243) |
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摘 要: | 【目的】rocE基因编码精氨酸降解途径中的精氨酸通透酶,通过分析苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt) rocE基因的转录活性,明确rocE基因的转录调控机制。【方法】通过RT-PCR确定rocE基因所在基因簇的转录单元;β-半乳糖苷酶活性测定分析rocE基因启动子(ProcE)的转录活性;采用同源重组技术敲除BtHD73菌株的rocE基因;通过融合His标签的方法在大肠杆菌中表达纯化RocR蛋白的HTH结构域;通过凝胶阻滞实验明确RocR与rocE基因启动子的结合作用。【结果】在M9培养基中,精氨酸可诱导ProcE的转录活性;在SSM培养基和精氨酸诱导培养基中,与出发菌株HD73相比,ProcE在sigL (编码Sigma54因子)突变体和rocR突变体中的转录活性显著下降。RocR-HTH蛋白与ProcE有结合作用。rocE基因的缺失对菌体生长和Cry1Ac蛋白产量无显著影响。rocE缺失突变体的芽胞形成率为65.5%,HD73出发菌株为85.7%,显著性分析结果表明差异显著(P0.05)。【结论】rocE基因的转录活性受Sigma54的控制,并受RocR正调控。rocE基因的缺失影响菌株的芽胞形成率。
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关 键 词: | 苏云金芽胞杆菌 精氨酸代谢 rocE 转录调控 |
收稿时间: | 2020/5/28 0:00:00 |
修稿时间: | 2020/10/21 0:00:00 |
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