猪Ⅱ型圆环病毒全基因组的克隆及感染性鉴定

设计合成一对扩增猪Ⅱ型圆环病毒（PCV2）全基因组的特异性引物，从3份患断奶后仔猪多系统衰弱综合征（PMWS）的死亡仔猪病料中，PCR扩增和克隆了3株PCV2全基因组序列。将所测序列与已公布的PCV毒株序列进行同源性比较，并绘制系统发育进化树。结果显示，所测毒株间的核苷酸同源性为957%～994%，与其它毒株的同源性较高，达951%以上；ORF1的核苷酸同源性高达978%以上，氨基酸同源性大于98%；ORF2的核苷酸同源性较低，为90%～98%不等，推导的氨基酸序列同源性介于87%～991%。进化树分析表明各分离毒株在进化上存在地域上的相关性。将克隆到的PCV2基因组环化后，脂质体介导转染PK15细胞，盲传3代。间接免疫荧光检测表明，克隆到的基因组具有感染性。

Cloning of Full Length Genome of Porcine Circovirus Type 2 and Identification of The Infectivity