| 塔玛亚历山大藻双向电泳蛋白的三种提取方法比较 |
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| 引用本文： | 原雅纬,郑伟,李少菁,王桂忠,郑天凌.塔玛亚历山大藻双向电泳蛋白的三种提取方法比较[J].微生物学报,2011,51(8):1113-1118. |
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| 作者姓名： | 原雅纬 郑伟 李少菁 王桂忠 郑天凌 |
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| 作者单位： | 1. 厦门大学近海海洋环境科学国家重点实验室,厦门大学海洋与环境学院,厦门361005;厦门大学滨海湿地生态系统教育部重点实验室,厦门大学生命科学学院,厦门361005
2. 厦门大学近海海洋环境科学国家重点实验室,厦门大学海洋与环境学院,厦门361005 |
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| 基金项目： | 国家“863 计划”(2008AA09Z408);国家自然科学基金重点项目、主任基金项目和面上项目(40930847，30940002，31070442);长江学者和创新团队发展计划项目(40821063) |
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| 摘 要： | 【目的】比较3种蛋白质提取方法,找到适用于塔玛亚历山大藻蛋白的最佳的提取方法,为后续用双向电泳(2-DE)技术研究不同条件下塔玛亚历山大藻蛋白的差异表达奠定基础。【方法】以塔玛亚历山大藻为研究对象,运用Tris-HCl提取法、TCA沉淀法和lysis buffer提取法分别提取塔玛亚历山大藻蛋白,并通过双向电泳技术,对这3种方法进行了比较分析,筛选出最适于塔玛亚历山大藻的蛋白提取方法。并运用以上得出的方法,以不加杀藻物质的无菌塔玛亚历山大藻为对照,比较分析了塔玛亚历山大藻在加入杀藻物质后的蛋白差异表达状况。【结果】在这3种方法中,lysis buffer提取法得到的蛋白溶解性好,进行双向电泳时,可得到干净的背景、清晰的蛋白点,并且蛋白点的数目较多,酸性蛋白、碱性蛋白、大分子量和小分子量的蛋白均有提出来,蛋白点在胶面上分布均匀。用这种方法初步分析了加入杀藻物质后塔玛亚历山大藻蛋白的差异表达情况,并鉴定出14个与塔玛亚历山大藻生理活动密切相关的蛋白质。【结论】lysis buffer提取法获得了最多的蛋白点,双向电泳图谱清晰,适于用来提取塔玛亚历山大藻蛋白。
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| 关 键 词： | 塔玛亚历山大藻 甲藻 双向电泳 蛋白提取方法 蛋白质组学 |
| 收稿时间： | 2011/2/16 0:00:00 |
| 修稿时间： | 5/5/2011 12:00:00 AM |
Comparison of three protein extraction methods for proteomic analysis of Alexandrium tamarense with twodimensional electrophoresis |
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| Yawei Yuan,Wei Zheng,Shaojing Li,Guizhong Wang and Tianling Zheng.Comparison of three protein extraction methods for proteomic analysis of Alexandrium tamarense with twodimensional electrophoresis[J].Acta Microbiologica Sinica,2011,51(8):1113-1118. |
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| Authors: | Yawei Yuan Wei Zheng Shaojing Li Guizhong Wang and Tianling Zheng |
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| Institution: | Yawei Yuan1,2,Wei Zheng1,Shaojing Li1,Guizhong Wang1,Tianling Zheng1,2* 1State Key Laboratory for Marine Environmental Science,Xiamen University,Xiamen 361005,China 2Key Laboratory for Ministry of Education for Coast and Wetland Ecosystem,School of Life Sciences,China |
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| Abstract: | Objective] In order to find the best extraction method for proteins of Alexandrium tamarense for two-dimensional electrophoresis(2-DE) analysis.Methods] Three methods for extracting proteins from A.tamarense were compared,including trihydroxymethyl aminomethane(Tris-HCl) buffer extraction,trichloroacetic acid(TCA)/acetone precipitation and lysis buffer extraction.Alga was cultivated in normal f/2 media(control) and supplemented with algicidal substances.Proteins obtained using the best extraction method w... |
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| Keywords: | Alexandrium tamarense dinoflagellates two-dimensional electrophoresis protein extraction |
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