| 过表达全局调控因子LaeA对橘青霉美伐他汀的合成及产孢的影响 |
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| 引用本文： | 郑跃亮,曹双,黄宇琪,廖国建,胡昌华.过表达全局调控因子LaeA对橘青霉美伐他汀的合成及产孢的影响[J].微生物学报,2014,54(12):1438-1445. |
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| 作者姓名： | 郑跃亮 曹双 黄宇琪 廖国建 胡昌华 |
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| 作者单位： | 西南大学药学院，重庆药物过程与质量控制工程技术中心，重庆400715;西南大学药学院，重庆药物过程与质量控制工程技术中心，重庆400715;西南大学药学院，重庆药物过程与质量控制工程技术中心，重庆400715;西南大学药学院，重庆药物过程与质量控制工程技术中心，重庆400715;西南大学药学院，重庆药物过程与质量控制工程技术中心，重庆400715 |
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| 基金项目： | 重大新药创制专项创新药物孵化基地子课题(2010zx09401-306-4-4);重庆科技攻关项目(cstc2013jcsf10002) |
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| 摘 要： | 【目的】研究橘青霉中全局性调控因子Lae A过表达对美伐他汀生物合成过程及产孢的影响。【方法】同源克隆法从橘青霉中克隆获得lae A基因,构建p Gi HTGi-lae A载体,经农杆菌介导转化转入橘青霉,利用hygromycin基因进行阳性克隆子的PCR筛选。使用HPLC方法比较PGA发酵液中橘青霉野生型菌株WT和Lae A过表达菌株OE::lae A的美伐他汀产量差异。血球计数法进行孢子产量比较。荧光定量PCR方法分析WT和OE::lae A中美伐他汀合成基因簇表达量。【结果】成功构建p Gi HTGi-lae A载体,并获得Lae A过表达橘青霉菌株(OE::lae A)。OE::lae A中,lae A基因表达量较WT增加29%,mlc B表达量较WT增加72%,mlcR表达量增加153%,孢子产量由(2.38±0.24)×107/cm2减少到(1.40±0.11)×107/cm2,美伐他汀产量从(35.77±4.63)mg/L提高到(201.46±9.98)mg/L。【结论】在橘青霉中过表达Lae A可能通过提高mlcR和mlc B基因的转录来增加美伐他汀的产量,同时过表达lae A基因不利于孢子的形成。这些结果为美伐他汀生物合成的全局性调控和高产菌株的开发提供基础。
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| 关 键 词： | 全局性调控因子LaeA 过表达 美伐他汀 途径调控因子mlcR 橘青霉 |
| 收稿时间： | 2014/4/24 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2014/8/20 0:00:00 |
Overexpression of LaeA enhances mevastatin production and reduces sporulation of Penicillium citrinum |
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| Yueliang Zheng,Shuang Cao,Yuqi Huang,Guojian Liao and Changhua Hu.Overexpression of LaeA enhances mevastatin production and reduces sporulation of Penicillium citrinum[J].Acta Microbiologica Sinica,2014,54(12):1438-1445. |
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| Authors: | Yueliang Zheng Shuang Cao Yuqi Huang Guojian Liao and Changhua Hu |
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