| 罗氏真养菌W50的L-阿拉伯糖代谢途径工程改造北大核心CSCD |
| |
| 引用本文： | 卢雪梅,刘桂明,王宇,丁久元,翁维琦.罗氏真养菌W50的L-阿拉伯糖代谢途径工程改造北大核心CSCD[J].微生物学报,2013,53(12):1267-1275. |
| |
| 作者姓名： | 卢雪梅 刘桂明 王宇 丁久元 翁维琦 |
| |
| 作者单位： | 中国科学院微生物研究所，北京100101;中国科学院微生物研究所，北京100101;中国科学院微生物研究所，北京100101;中国科学院微生物研究所，北京100101;中国科学院微生物研究所，北京100101 |
| |
| 摘 要： | 【目的】在产聚-β-羟基丁酸酯(Poly-β-hydroxybutyrate,PHB)的罗氏真养菌(Ralstonia eutropha)H16突变株W50中建立完整的阿拉伯糖代谢途径,引入高亲和力阿拉伯糖转运蛋白,获得能利用L-阿拉伯糖的重组菌株,为获得能高效利用纤维质降解物并积累PHB的工程菌株奠定基础。【方法】利用PCR技术扩增R.eutropha H16的PHB合酶启动子P pha C1、大肠杆菌(Escherichia coli)W3110的阿拉伯糖代谢酶基因araBAD和高亲和力阿拉伯糖转运蛋白基因araFGH。将P pha C1、araBAD与表达载体pBBR1MCS连接,构建带有阿拉伯糖代谢酶基因的表达载体,转化R.eutropha W50得到重组菌株W50-1。利用双质粒和染色体重组两种方法将araFGH导入W50-1菌,分别得到重组菌株W50-2和W50-3。通过摇瓶发酵研究重组菌株W50-1、W50-2和W50-3的发酵特性。【结果】酶活分析结果表明,阿拉伯糖代谢酶基因实现了表达。重组菌株W50-1、W50-2和W50-3均能利用L-阿拉伯糖,并且表达了转运蛋白基因的重组菌利用L-阿拉伯糖的能力提高。摇瓶发酵结果表明,W50-1可以在含0.1 mol/L阿拉伯糖的发酵培养基中生长,但不能利用低浓度(0.01 mol/L)阿拉伯糖。W50-2、W50-3菌株能够利用低浓度阿拉伯糖生长,并且在含0.1 mol/L阿拉伯糖的培养基中,W50-3的生物量是W50-1的2.5倍,合成的PHB占菌体干重的38.6%。【结论】在R.eutropha W50中表达阿拉伯糖代谢酶基因及转运蛋白基因,可以使其高效利用L-阿拉伯糖生长并积累一定水平的PHB。
|
| 关 键 词： | L-阿拉伯糖代谢 转运蛋白 聚-β-羟基丁酸酯 Ralstonia eutropha L-arabinose metabolism transporter poly-β-hydroxybutyrate Ralstonia eutropha |
| 收稿时间： | 2013/4/15 0:00:00 |
| 修稿时间： | 6/7/2013 12:00:00 AM |
Engineering of an L-arabinose metabolic pathway in Ralstonia eutropha W50 |
| |
| Xuemei Lu,Guiming Liu,Yu Wang,Jiuyuan Ding and Weiqi Weng.Engineering of an L-arabinose metabolic pathway in Ralstonia eutropha W50[J].Acta Microbiologica Sinica,2013,53(12):1267-1275. |
| |
| Authors: | Xuemei Lu Guiming Liu Yu Wang Jiuyuan Ding and Weiqi Weng |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 维普 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《微生物学报》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《微生物学报》下载免费的PDF全文 |
|
