|
|||||
|
|
| 鸡白介素18成熟蛋白突变体在毕赤酵母中的高效表达及其生物活性检测 | |
| 引用本文： | 王希辉,岳寿松,胡敬东,黄亦钧,陈金龙,王婷婷,范忠玲,赵宏坤.鸡白介素18成熟蛋白突变体在毕赤酵母中的高效表达及其生物活性检测[J].微生物学报,2010,50(9):1258-1263. |
| 作者姓名： | 王希辉 岳寿松 胡敬东 黄亦钧 陈金龙 王婷婷 范忠玲 赵宏坤 |
| 作者单位： | 1. 山东农业科学院高新技术研究中心,济南,250000 2. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018 3. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018;青岛农业大学食品科学与工程学院,山东省肉类食品质量控制工程技术研究中心,青岛,266109 |
| 基金项目： | 国家“十一五”食品安全关键技术重大项目（2006BAK02A21）；国家肉鸡产业技术体系建设项目；山东省科技支撑计划项目“肉鸡福利型养殖模式的建立与应用”（2007GG20009001） |
| 摘 要： | 【目的】通过目的基因克隆,表达获得高产量具有生物活性的鸡白介素18成熟蛋白(maturechickeninterleukin-18,mChIL-18)。【方法】根据毕赤酵母密码子偏嗜性,通过引物设计来定点突变鸡白介素18基因,构建了重组质粒pPIC9K-mChIL-18。将线性化的重组阳性质粒电转到毕赤酵母GS115中,经筛选多拷贝阳性子后进行诱导表达。用MTT法和微量细胞病变抑制法检测其生物活性。【结果】筛选的多拷贝重组菌在诱导温度为28℃,培养液pH值为6.5,甲醇的诱导浓度为2%,诱导时间为120h时表达量最高,约为480mg/L。表达的mChIL-18蛋白能够刺激SPF鸡淋巴细胞大量增殖,用400μg/L的mChIL-18诱导淋巴细胞产生γ-干扰素(IFN-γ),其生物活性最高可达1.7×104U/mL,且能有效抑制水泡性口炎病毒(VSV)在鸡胚成纤维细胞(CEF)上的生长。【结论】毕赤酵母能够高效表达具有生物活性的鸡白介素18,有望作为免疫佐剂运用到工业化生产和兽医临床中。 |
| 关 键 词： | 关键词：鸡白介素18 毕赤酵母 突变体 生物活性 |
| 收稿时间： | 2/5/2010 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 2010/4/13 0:00:00 |
Expression and bioactivity assay of mature chicken interleukin-18 protein mutant using Pichia pastoris expression system |
|
| Xihui Wang,Shousong Yue,Jingdong Hu,Yijun Huang,Jinlong Chen,Tingting Wang,Zhongling Fan and Hongkun Zhao.Expression and bioactivity assay of mature chicken interleukin-18 protein mutant using Pichia pastoris expression system[J].Acta Microbiologica Sinica,2010,50(9):1258-1263. | |
| Authors: | Xihui Wang Shousong Yue Jingdong Hu Yijun Huang Jinlong Chen Tingting Wang Zhongling Fan and Hongkun Zhao |
| Abstract: | |
| Keywords: | Keywords: chicken interleukin-18 Pichia pastoris mutant bioactivity |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ | |
| 点击此处可从《微生物学报》浏览原始摘要信息 | |
| 点击此处可从《微生物学报》下载免费的PDF全文 | |