马立克氏病病毒pp38基因和1.8kb转录子之间双向启动子的特性研究

从马立克氏病病毒(MDV)基因组DNA复制原点区某一点，将介于MDV pp38基因和18kb转录子之间的双向启动子分割成两个单方向的启动子。以pp38为报告基因，pUC18质粒为载体，构建了含不同方向完整启动子序列的pProfpp38和 pProrpp38质粒，以及含分割后单方向启动子序列的pdProfpp38和pdProrpp38质粒。4种质粒分别转染鸡胚成纤维细胞（Chicken embryo fibroblast， CEF）后，均能检测到pp38基因的表达。进一步以氯霉素乙酰转移酶（Chloramphenicol acetyltransferase， CAT）为报告基因，构建了含不同方向完整双向启动子的pProfCAT和 pProrCAT质粒，以及含分割后单方向启动子序列的pdProfCAT和 pdProrCAT质粒。通过转染试验，定量分析了完整启动子和分割后启动子在两个方向上的启动活性。实验结果表明，分割后的启动子在两个方向上的启动活性均比相应方向上完整启动子的活性低，其中1.8kb转录子方向上的活性下降了41倍。