| Aspergillus fumigatus来源植酸酶的Q23L和Q23LG272E突变研究 |
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| 引用本文： | 谷维娜,杨培龙,王亚茹,罗会颖,孟昆,伍宁丰,姚斌,范云六.Aspergillus fumigatus来源植酸酶的Q23L和Q23LG272E突变研究[J].微生物学报,2007,23(2). |
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| 作者姓名： | 谷维娜 杨培龙 王亚茹 罗会颖 孟昆 伍宁丰 姚斌 范云六 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院饲料研究所，北京 100081;中国农业科学院饲料研究所，北京 100081;中国农业科学院饲料研究所，北京 100081;中国农业科学院饲料研究所，北京 100081;中国农业科学院饲料研究所，北京 100081;中国农业科学院生物技术研究所, 北京 100081;中国农业科学院饲料研究所，北京 100081;中国农业科学院生物技术研究所, 北京 100081 |
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| 基金项目： | 国际科技合作重点项目计划(No.2004DFA06800)和国家“973”项目(No.2004CB719606)资助。 |
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| 摘 要： | Aspergillus fumigatus来源的植酸酶具有热稳定性好、pH作用范围广的优点, 但其比活性很低。设计的植酸酶Q23L突变能在pH4.5～7.0范围内大幅提高比活性，但pH稳定性却显著下降, 为了进一步改良Q23L的pH稳定性, 在Q23L分子上加入了G272E突变。将原酶、突变酶Q23L和突变酶Q23LG272E分别在毕赤酵母GS115中表达，表达酶经纯化后进行酶学性质比较分析,结果表明：突变酶Q23L的比活性比原酶显著提高, 在pH5.5比活性由51u/mg提高到109u/mg, 但其pH稳定性, 尤其是在pH3.0～4.0酸性条件下的稳定性却显著降低，低于80%。突变酶Q23LG272E在pH3.0～4.5和pH6.5～7.0时的稳定性比Q23L有所提高, 恢复到原酶的水平，而比活性基本维持在Q23L的水平。通过一级序列和三维结构比较，分析了可能影响Q23LG272E酶学性质的因素，为进一步研究植酸酶的结构与功能提供了材料。
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| 关 键 词： | 植酸酶， 定点突变， 毕赤酵母 |
Mutation Research on Q23L and Q23LG272E in Phytase Derivated from Aspergillus fumigatus |
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| GU Wei-N,YANG Pei-Long,WANG Ya-Ru,LUO Hui-Ying,MENG Kun,WU Ning-Feng,YAO Bin and FAN Yun-Liu.Mutation Research on Q23L and Q23LG272E in Phytase Derivated from Aspergillus fumigatus[J].Acta Microbiologica Sinica,2007,23(2). |
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| Authors: | GU Wei-N YANG Pei-Long WANG Ya-Ru LUO Hui-Ying MENG Kun WU Ning-Feng YAO Bin and FAN Yun-Liu |
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| Institution: | Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China;Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China;Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China;Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China;Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China;Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China;Feed Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China;Biotechnology Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | phytase site-directed mutagenesis Pichia pastoris |
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