枯草芽孢杆菌耐盐突变株proA基因克隆proBA基因渗透压调节功能研究 |
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引用本文: | 刘瑞杰,曹军卫,苗丽霞.枯草芽孢杆菌耐盐突变株proA基因克隆proBA基因渗透压调节功能研究[J].微生物学报,2004,44(4). |
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作者姓名: | 刘瑞杰 曹军卫 苗丽霞 |
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作者单位: | 武汉大学生命科学学院 武汉 430072 |
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摘 要: | 利用TaKaRa LA PCRTM试剂盒扩增枯草芽孢杆菌93151耐盐突变株proA基因的未知下游序列。根据测序结果,设计引物,克隆出发菌株和突变株全长proBA基因。将出发菌株和突变株的proBA基因分别转化大肠杆菌JM83(proBA\+-),均能够与其功能互补。SDSPAGE分析其表达产物,有两条分子量分别约为40kD和45kD的新蛋白带出现。测定4种转化子(分别含有出发菌株和突变株proB基因的大肠杆菌1.1252转化子及proBA基因的大肠杆菌JM83转化子)的耐盐能力。发现含有突变株proB或proBA基因转化子的耐盐能力,均比相应的含有出发菌株proB或proBA基因的转化子高。另外含有出发菌株和突变株的proBA基因转化子的耐盐能力, 也均比相应的仅含proB基因的转化子高, 表明枯草芽孢杆菌的ProA比大肠杆菌的ProA更为有效。测定所有JM83转化子胞内自由脯氨酸,发现其含量随盐浓度的上升而提高,其中含突变菌株proBA基因的转化子提高更为显著。
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关 键 词: | 枯草芽孢杆菌,耐盐突变株,proBA基因,渗透压胁迫 |
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