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MC 3T3-E1细胞在纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架上的增殖和分化
引用本文:孔丽君,敖强,奚静,张玲,公衍道,赵南明,张秀芳.MC 3T3-E1细胞在纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架上的增殖和分化[J].微生物学报,2007,23(2).
作者姓名:孔丽君  敖强  奚静  张玲  公衍道  赵南明  张秀芳
作者单位:清华大学生物科学与技术系,生物膜与膜生物工程国家重点实验室,北京 100084;清华大学脑神经疾病研究所,北京 100084;清华大学生物科学与技术系,生物膜与膜生物工程国家重点实验室,北京 100084;清华大学生物科学与技术系,生物膜与膜生物工程国家重点实验室,北京 100084;清华大学生物科学与技术系,生物膜与膜生物工程国家重点实验室,北京 100084;清华大学生物科学与技术系,生物膜与膜生物工程国家重点实验室,北京 100084;清华大学生物科学与技术系,生物膜与膜生物工程国家重点实验室,北京 100084
基金项目:国家“973”项目(No. 2005CB623905)、清华-裕元医学研究基金、北京市科委项目(No. H060920050430)和国家自然科学基金项目(No. 30670528)支持
摘    要:用原位合成纳米羟基磷灰石的方法制备多孔纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架;在支架上接种MC 3T3-E1细胞,瑞氏染色检测细胞形态,MTT法检测其增殖情况;在诱导培养基中培养30d后,碱性磷酸酶染色比较其分化水平;定量检测细胞的碱性磷酸酶活性;RT-PCR检测成骨相关基因的表达情况。实验结果表明:MC 3T3-E1细胞在纳米级羟基磷灰石/壳聚糖复合支架上粘附铺展良好,其增殖率显著高于培养于纯壳聚糖支架上的细胞。碱性磷酸酶染色表明复合支架上的细胞有较高水平的碱性磷酸酶表达。进一步定量检测细胞的碱性磷酸酶活性,结果说明在复合支架上细胞比纯壳聚糖支架上培养的细胞碱性磷酸酶活性提高了约8倍。此外,骨分化相关特征基因骨桥蛋白OPN在复合支架上培养的细胞中的表达水平也明显高于纯壳聚糖上培养的细胞。分化成熟标志基因骨钙素OC在复合支架上培养的细胞中有表达,但是纯壳聚糖支架上培养的细胞中却未检测到。支架中纳米羟基磷灰石的加入不仅提高了前成骨细胞在复合支架上的增殖,而且还促进了它的分化。纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架表现出良好的生物相容性和生物活性,是极具前景的骨组织工程支架材料。

关 键 词:组织工程,  分化,  纳米羟基磷灰石,  壳聚糖,  生物相容性

Proliferation and Differentiation of MC 3T3-E1 Cells Cultured on Nanohydroxyapatite/chitosan Composite Scaffolds
KONG Li-Jun,AO Qiang,XI Jing,ZHANG Ling,GONG Yan-Dao,ZHAO Nan-Ming and ZHANG Xiu-Fang.Proliferation and Differentiation of MC 3T3-E1 Cells Cultured on Nanohydroxyapatite/chitosan Composite Scaffolds[J].Acta Microbiologica Sinica,2007,23(2).
Authors:KONG Li-Jun  AO Qiang  XI Jing  ZHANG Ling  GONG Yan-Dao  ZHAO Nan-Ming and ZHANG Xiu-Fang
Institution:Department of Biological Sciences and Biotechnology, State Key Lab of Biomembrane and Membrane Biotechnology, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Institute of Neurological Disorder, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Department of Biological Sciences and Biotechnology, State Key Lab of Biomembrane and Membrane Biotechnology, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Department of Biological Sciences and Biotechnology, State Key Lab of Biomembrane and Membrane Biotechnology, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Department of Biological Sciences and Biotechnology, State Key Lab of Biomembrane and Membrane Biotechnology, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Department of Biological Sciences and Biotechnology, State Key Lab of Biomembrane and Membrane Biotechnology, Tsinghua University, Beijing 100084, China;Department of Biological Sciences and Biotechnology, State Key Lab of Biomembrane and Membrane Biotechnology, Tsinghua University, Beijing 100084, China
Abstract:
Keywords:
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