| 具有a-淀粉酶分泌活性以及低双乙酰产量的啤酒酵母工程菌的构建 |
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| 引用本文： | 张峰,王肇悦,刘楠,何秀萍,张博润.具有a-淀粉酶分泌活性以及低双乙酰产量的啤酒酵母工程菌的构建[J].微生物学报,2008,24(5):837-843. |
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| 作者姓名： | 张峰 王肇悦 刘楠 何秀萍 张博润 |
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| 作者单位： | 中国科学院微生物研究所, 北京 100101; 中国科学院研究生院, 北京 100039;中国科学院微生物研究所, 北京 100101;中国科学院微生物研究所, 北京 100101;中国科学院微生物研究所, 北京 100101;中国科学院微生物研究所, 北京 100101 |
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| 摘 要： | 扣囊复膜酵母(Saccharomycopsis fibuligera)因具有较强的a-淀粉酶以及葡聚糖酶活性, 使其在以淀粉为唯一碳源的培养基上能够良好的生长。从其基因组中克隆了a-淀粉酶的编码区, 构建了由酵母磷酸甘油酸激酶基因(PGK1)启动子、酿酒酵母a-因子信号序列以及扣囊复膜酵母a-淀粉酶基因编码序列组成的基因表达盒。将该表达盒插入到质粒pPLZ-2的ILV2基因序列内部, 使其两翼具有ILV2基因的同源区。将该表达盒通过同源重组的方式整合到啤酒酵母工业菌株YSF-5的a-乙酰乳酸合成酶(AHAS)基因ILV2内部。在以淀粉为唯一碳源的培养基上进行转化子的筛选。通过多对引物PCR、a-淀粉酶活性以及AHAS活性分析对转化子进行鉴定, 得到一株具有a-淀粉酶分泌表达活性、较低AHAS活性, 并且发酵液中双乙酰产量也相对较低的啤酒酵母工程菌。该菌株在非选择压力条件下连续培养50代后仍然保持其遗传稳定性。还对pH、温度以及金属离子对该转化菌株的a-淀粉酶活性的影响进行了研究。由于所构建的菌株不含有非酵母来源的DNA, 所以生物安全性相对较高, 对酵母育种以及啤酒生产工业都具有较为重要的意义。
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| 关 键 词： | 啤酒酵母工程菌 a-淀粉酶 双乙酰 a信号肽 |
Construction of a New Brewing Yeast Strain with Secretive a-amylase Activity and Reduced Diacetyl Production |
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| Feng Zhang,Zhaoyue Wang,Nan Liu,Xiuping He and Borun Zhang.Construction of a New Brewing Yeast Strain with Secretive a-amylase Activity and Reduced Diacetyl Production[J].Acta Microbiologica Sinica,2008,24(5):837-843. |
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| Authors: | Feng Zhang Zhaoyue Wang Nan Liu Xiuping He and Borun Zhang |
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| Institution: | The Laboratory of Molecular Genetics and Breeding of Yeast, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China; Graduate School of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100039, China;The Laboratory of Molecular Genetics and Breeding of Yeast, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;The Laboratory of Molecular Genetics and Breeding of Yeast, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;The Laboratory of Molecular Genetics and Breeding of Yeast, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;The Laboratory of Molecular Genetics and Breeding of Yeast, Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China |
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