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高山被孢霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆、结构分析及其功能的研究
引用本文:李明春,刘莉,胡国武,邢来君.高山被孢霉Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆、结构分析及其功能的研究[J].微生物学报,2003,43(2).
作者姓名:李明春  刘莉  胡国武  邢来君
作者单位:南开大学微生物系 天津 300071
基金项目:国家自然科学基金,教育部高校骨干教师资助计划 
摘    要:从高山被孢霉ATCC16266总DNA中扩增出大小为1374bp和1947bp的两条特异片段,序列分析表明后者在细胞色素b5和组氨酸Ⅰ之间含有一大小为573bp的内含子和两条分别为197bp和828bp的外显子。推导的氨基酸二级结构分析表明,该基因有两个长的跨膜疏水区和3个组氨酸保守区。分别根据D6D内含子及组氨酸Ⅱ区、Ⅲ区的序列设计引物,制备不同的探针与高山被孢霉的基因组杂交,证明在其基因组中确实存在两个Δ6脂肪酸脱氢酶基因,其中一个基因含有内含子。把不含有内含子的核基因MAGL61克隆到的酿酒酵母表达载体pYES20中,转化到酿酒酵母INVSc1中。对筛选得到的酵母工程菌株进行脂肪酸GC分析,检测到了γ亚麻酸,说明克隆的D6D基因MAGL61能在酿酒酵母中进行功能性表达。

关 键 词:高山被孢霉,Δ6脂肪酸脱氢酶基因,基因组,内含子

Studies on the Cloning, Structure and Function of the Δ6-Fatty Acid Desaturase Genes from Mortierella aplina
Abstract:
Keywords:
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