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口蹄疫病毒VP1基因在番茄中的表达及转基因番茄对豚鼠诱导免疫保护
引用本文:潘丽,张永光,王永录,王宝琴,谢庆阁.口蹄疫病毒VP1基因在番茄中的表达及转基因番茄对豚鼠诱导免疫保护[J].微生物学报,2006,46(5):796-801.
作者姓名:潘丽  张永光  王永录  王宝琴  谢庆阁
作者单位:中国农业科学院兰州兽医研究所,家畜疫病病原生物学国家重点实验室,农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州,730046
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)
摘    要:构建克隆有O型口蹄疫病毒China99株VP1基因的植物双元表达载体pBin438/VP1。通过农杆菌介导法转化番茄子叶,经卡那霉素抗性筛选,获得60株抗性植株。对抗性植株分别做PCR、RT-PCR检测目的基因的整合与转录,ELISA筛选约40%的卡那抗性植株阳性,分别提取两株ELISA和Western blot检测阳性的转基因番茄叶片蛋白与弗氏佐剂乳化,于0、15、30d经肌肉途径免疫豚鼠,第三次免疫后28d用100ID50的同源强毒攻击,根据豚鼠抗体水平的消长动态和免疫豚鼠抗强毒攻击的保护率进行转基因植物疫苗免疫原性的评估。结果表明,双元表达载体pBin438/VP1构建正确,PCR、RT-PCR结果证实口蹄疫病毒VP1基因已整合到番茄基因组并在转录水平表达,ELISA和Western blot检测重组蛋白能够与FMDV阳性血清反应。转基因番茄第三次免疫豚鼠后21d血清效价最高可达1∶64,攻毒后两组免疫豚鼠保护率分别达80%和40%,证明转基因番茄表达的VP1蛋白具有良好的免疫原性。

关 键 词:口蹄疫病毒  VP1基因  转基因番茄  豚鼠  免疫原性
文章编号:0001-6209(2006)05-0796-06
收稿时间:2005-10-26
修稿时间:2006-03-29

Protective immune response of guinea pigs against challenge with foot and mouth disease virus by immunization with foliar extracts from transgenic tomato plants expressing the FMDV structural protein VP1
PAN Li,ZHANG Yong-guang,WANG Yong-lu,WANG Bao-qin,XIE Qing-ge.Protective immune response of guinea pigs against challenge with foot and mouth disease virus by immunization with foliar extracts from transgenic tomato plants expressing the FMDV structural protein VP1[J].Acta Microbiologica Sinica,2006,46(5):796-801.
Authors:PAN Li  ZHANG Yong-guang  WANG Yong-lu  WANG Bao-qin  XIE Qing-ge
Institution:Key Laboratory of Animal Virology of Ministry of Agriculture, State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology Lanzhou Veterinary Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Lanzhou 730046, China
Abstract:
Keywords:Foot-and-mouth disease virus  VP1 gene  Transgenic tomato  Immunogenicity  Guinea pigs  
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