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植酸酶和甘露聚糖酶双功能毕赤酵母工程菌的构建和产酶分析
引用本文:黄生平,汪昌丽,张桂敏,马立新.植酸酶和甘露聚糖酶双功能毕赤酵母工程菌的构建和产酶分析[J].微生物学报,2007,47(2):280-284.
作者姓名:黄生平  汪昌丽  张桂敏  马立新
作者单位:湖北大学生命科学学院,分子微生物与基因工程研究室,武汉,430062
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划);湖北省自然科学基金;湖北省武汉市青年科技晨光计划
摘    要:根据已发表的植酸酶基因和甘露聚糖酶基因序列设计并合成引物,应用PCR技术,分别以土曲霉总DNA和质粒pHBM1201为模板,扩增出均不含假定信号肽序列的植酸酶基因phyA和甘露聚糖酶基因man,将它们各自克隆到毕赤酵母表达载体pHBM907C上,分别得到重组质粒pHBM907C-phyA和pHBM907C-man。将质粒pHBM907C-phyA上由乙醇氧化酶(AOX1)启动子和终止子引导表达、酿酒酵母α信号肽序列引导分泌的phyA表达盒式结构插入到质粒pHBM907C-man中,构成双基因表达分泌质粒pHBM907C-phyA-man。pHBM907C-phyA-man经SalⅠ酶切线性后转化毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115,获得了同时分泌表达植酸酶和甘露聚糖酶的双功能酵母工程菌。研究了该酵母工程菌所分泌表达的重组植酸酶和甘露聚糖酶的相关酶学性质,并进行了双功能酵母工程菌的稳定性测试。

关 键 词:植酸酶  甘露聚糖酶  毕赤酵母  共表达
文章编号:0001-6209(2007)02-0280-05
收稿时间:2006/7/20 0:00:00
修稿时间:2006-07-20

Construction of a double functional recombinant strainof Pichia pastoris co-expressing phytase and mannanase and the enzymatic analyses
HUANG Sheng-ping,WANG Chang-li,ZHANG Gui-min and MA Li-xin.Construction of a double functional recombinant strainof Pichia pastoris co-expressing phytase and mannanase and the enzymatic analyses[J].Acta Microbiologica Sinica,2007,47(2):280-284.
Authors:HUANG Sheng-ping  WANG Chang-li  ZHANG Gui-min and MA Li-xin
Institution:Laboratory of Molecular Microbiology & Gene Engineering; College of Life Science; Hubei University; Wuhan 430062; China;Laboratory of Molecular Microbiology & Gene Engineering; College of Life Science; Hubei University; Wuhan 430062; China;Laboratory of Molecular Microbiology & Gene Engineering; College of Life Science; Hubei University; Wuhan 430062; China;Laboratory of Molecular Microbiology & Gene Engineering; College of Life Science; Hubei University; Wuhan 430062; China
Abstract:
Keywords:phytase  mannanase  Pichia pastoris  co-expression
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