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嗜酸嗜热古菌Sulfolobus acidocaldarius编码尿嘧啶DNA糖苷酶表达,纯化与酶学特征
引用本文:王婧,易刚顺,欧杰,刘建华,刘喜朋.嗜酸嗜热古菌Sulfolobus acidocaldarius编码尿嘧啶DNA糖苷酶表达,纯化与酶学特征[J].微生物学报,2015,55(8):1036-1041.
作者姓名:王婧  易刚顺  欧杰  刘建华  刘喜朋
作者单位:上海交通大学生命科学技术学院,上海200240,上海交通大学生命科学技术学院,上海200240,上海海洋大学食品学院,上海201306,上海交通大学生命科学技术学院,上海200240,上海交通大学生命科学技术学院,上海200240
基金项目:国家自然科学基金(J1210047),上海市自然科学基金(12ZR1413700)
摘    要:摘要:【目的】嗜高温微生物面临dC脱氨基生成dU损伤的巨大压力,鉴定嗜酸嗜热古菌S.acidocaldarius来源的尿嘧啶DNA糖苷酶(UDG)切除dU损伤的酶学活性。【方法】重组表达来源于S.acidocaldarius的IV和V型UDG,经亲和纯化得到电泳纯重组蛋白。然后利用人工合成的dU(deoxyuracil)修饰寡核苷酸片段作为底物,体外鉴定两种重组UDG 的酶学特性。【结果】来源于S.acidocaldarius的IV和V型重组UDG具有相似的酶学特性。IV型UDG催化效率更高,比活性是V型重组UDG的750倍左右。作为来自嗜热微生物 的蛋白,S.acidocaldarius的IV和V型UDG的最适反应温度为65-75℃。【结论】IV型UDG比V型UDG水解dU碱基和脱氧核糖之间糖苷键的能力更强。

关 键 词:关键词:古菌,嗜酸嗜热硫化叶菌,dU碱基损伤,DNA修复,尿嘧啶DNA糖苷酶
收稿时间:2014/10/2 0:00:00
修稿时间:2015/3/11 0:00:00
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