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一株桑树内生拮抗菌的分离、鉴定及发酵条件优化
引用本文:方翔,徐伟芳,牛娜,欧婷,王飞,左伟东,谢洁.一株桑树内生拮抗菌的分离、鉴定及发酵条件优化[J].微生物学报,2018,58(12):2147-2160.
作者姓名:方翔  徐伟芳  牛娜  欧婷  王飞  左伟东  谢洁
作者单位:家蚕基因组生物学国家重点实验室, 西南大学生物技术学院, 重庆 400715,家蚕基因组生物学国家重点实验室, 西南大学生物技术学院, 重庆 400715,深圳出入境检验检疫局食品检验检疫技术中心, 广东 深圳 518000,家蚕基因组生物学国家重点实验室, 西南大学生物技术学院, 重庆 400715,家蚕基因组生物学国家重点实验室, 西南大学生物技术学院, 重庆 400715,家蚕基因组生物学国家重点实验室, 西南大学生物技术学院, 重庆 400715,家蚕基因组生物学国家重点实验室, 西南大学生物技术学院, 重庆 400715
基金项目:国家自然科学基金(31601678);西南大学本科生科技创新基金(20163107002)
摘    要:【目的】利用植物内生拮抗菌防治植物病害是一种有效的生物防治手段。本研究从健康桑树中分离筛选桑椹菌核病拮抗性内生细菌,为桑椹菌核病生物防治提供优良菌种。【方法】釆用组织分离培养法及抑菌圈法分离、筛选桑椹菌核病拮抗性内生细菌;根据菌体形态、培养特征、生理生化特性及基于16S rDNA序列的系统发育分析,对抑菌活性显著且稳定的菌株进行菌种鉴定;进而利用菌丝生长速率法检测活性发酵液的抑菌谱与热稳定性,并通过单因素及正交试验优化该菌株产生抑菌活性物质的发酵条件。【结果】从健康桑树中共分离获得55株内生细菌,其中XP-27菌株对核盘菌PZ-2的抑菌活性稳定且拮抗效果明显;XP-27菌株形态、培养特征、生理生化特性与芽孢杆菌属相符,基于16S rDNA序列的系统发育分析结果显示该菌株与多株甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)的亲缘关系最近,且处于系统发育树的同一分枝,故将XP-27菌株鉴定为甲基营养型芽孢杆菌,命名为B.methylotrophicusXP-27;抑菌谱与热稳定性实验结果表明XP-27菌株对灰霉菌SWU5、腐霉菌SWU3等10种常见植物病原菌具不同程度的抑制作用,且其发酵滤液热稳定性强;发酵条件优化结果表明该菌株最佳培养基配方与培养条件为:牛肉膏1.00%,淀粉1.50%,K_2HPO_4 0.05%,MgSO_4·7H_2O 0.10%,初始pH值为8.0,培养温度为30°C,接种量为7%,发酵时间为120 h。【结论】筛选获得的桑树内生细菌B. methylotrophicus XP-27对桑椹菌核病病原菌核盘菌PZ-2具有显著拮抗作用,可作为开发桑椹菌核病生防制剂的候选菌株。

关 键 词:桑椹菌核病  桑树内生菌  拮抗菌  发酵优化
收稿时间:2018/1/19 0:00:00
修稿时间:2018/5/30 0:00:00

Screening, identification and optimization of fermentation conditions of an antagonistic endophytic bacterium from mulberry
Xiang Fang,Weifang Xu,Na Niu,Ting Ou,Fei Wang,Weidong Zuo and Jie Xie.Screening, identification and optimization of fermentation conditions of an antagonistic endophytic bacterium from mulberry[J].Acta Microbiologica Sinica,2018,58(12):2147-2160.
Authors:Xiang Fang  Weifang Xu  Na Niu  Ting Ou  Fei Wang  Weidong Zuo and Jie Xie
Institution:State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, College of Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715, China,State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, College of Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715, China,Food Inspection and Quarantine Technical Center of Shenzhen Entry and Exit Inspection and Quarantine Bureau, Shenzhen 518000, Guangdong Province, China,State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, College of Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715, China,State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, College of Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715, China,State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, College of Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715, China and State Key Laboratory of Silkworm Genome Biology, College of Biotechnology, Southwest University, Chongqing 400715, China
Abstract:
Keywords:mulberry fruit sclerotiniose  mulberry endophyte  antagonistic bacterium  fermentation optimization
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