| 不同启动子控制下木酮糖激酶的差异表达及其对酿酒酵母木糖代谢的影响 |
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| 引用本文： | 彭炳银,陈晓,沈煜,鲍晓明.不同启动子控制下木酮糖激酶的差异表达及其对酿酒酵母木糖代谢的影响[J].微生物学报,2011,51(7):914-922. |
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| 作者姓名： | 彭炳银 陈晓 沈煜 鲍晓明 |
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| 作者单位： | 山东大学,微生物技术国家重点实验室,济南,250100 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(30970091，31070096) |
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| 摘 要： | 目的]以不同强度的启动子控制表达木酮糖激酶基因,并研究其引起的不同木酮糖激酶活性水平对木糖利用酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)代谢流向的影响.方法]以酿酒酵母CEN.PK 113-5D为出发菌株,选择酿酒酵母内源启动子TEF1p,PGK1p和HXK2p,利用Cre-loxP无标记同源重组系统,置换染色体上木酮糖激酶基因XKS1的启动子(XKS1p)序列;并通过附加体质粒引入木糖代谢上游途径,构建不同水平表达木酮糖激酶的木糖利用工程菌株;从木酮糖激酶的转录水平、酶活水平、胞内的ATP浓度及木糖代谢等性状,对各菌株进行评价.结果]转录及酶活测定结果显示,与天然状态相比,所选择的启动子对木酮糖激酶均表现出更强的启动效率.菌株体内表达木酮糖激酶活性水平由高至低的顺序为其基因XKS1在启动子PGK1p、TEF1p、HXK2p和XKS1p控制下.随着木酮糖激酶的活性的提高,胞内的ATP水平下降,而转化木糖生成乙醇的能力上升.最高乙醇产率为0.35g/g消耗的总糖,此时副产物木糖醇产率最低,为0.18g/g消耗的木糖.结论]通过在染色体上置换启动子,提高了木酮糖激酶的表达水平.在一定范围内,木酮糖激酶的高活性有利于木糖向乙醇的转化.
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| 关 键 词： | 酿酒酵母 启动子 木酮糖激酶 木糖 乙醇 |
| 收稿时间： | 1/3/2011 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 3/9/2011 12:00:00 AM |
Effect of controlled overexpression of xylulokinase by different promoters on xylose metabolism in Saccharomyces cerevisiae |
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| Bingyin Peng,Xiao Chen,Yu Shen and Xiaoming Bao.Effect of controlled overexpression of xylulokinase by different promoters on xylose metabolism in Saccharomyces cerevisiae[J].Acta Microbiologica Sinica,2011,51(7):914-922. |
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| Authors: | Bingyin Peng Xiao Chen Yu Shen and Xiaoming Bao |
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| Institution: | Bingyin Peng,Xiao Chen,Yu Shen,Xiaoming Bao The State Key Laboratory of Microbial Technology,Shandong University,Jinan 250100,China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Saccharomyces cerevisiae promoter xylulokinase xylose ethanol |
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