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犬2型腺病毒通用载体的构建及鉴定
引用本文:李忠,张守峰,崔艳,王晓虎,刘晔,扈荣良.犬2型腺病毒通用载体的构建及鉴定[J].微生物学报,2007,23(2).
作者姓名:李忠  张守峰  崔艳  王晓虎  刘晔  扈荣良
作者单位:军事医学科学院军事兽医研究所, 长春 130062;吉林大学畜牧兽医学院, 长春 130062;军事医学科学院军事兽医研究所, 长春 130062;军事医学科学院军事兽医研究所, 长春 130062;军事医学科学院军事兽医研究所, 长春 130062;吉林大学畜牧兽医学院, 长春 130062;军事医学科学院军事兽医研究所, 长春 130062;军事医学科学院军事兽医研究所, 长春 130062
基金项目:国家自然科学基金项目(No.30471294)资助。
摘    要:为了获得能够携带较大外源基因的犬2型腺病毒E3区缺失性载体,以犬2型腺病毒全基因组质粒pPolyⅡ-CAV-2及E3区重组质粒pVAX-E3为基础,缺失1381bp的E3区片段(92.6%的E3区全序列),插入Linker-NF(内含NotⅠ、ClaⅠ、FseⅠ多克隆位点),获得重组载体质粒pPolyⅡ-CAV-2-ΔE3(NF)(31.9kb)。以AscⅠ和PmeⅠ双酶切,游离重组基因组,在脂质体LipofectamineTM 2000介导下,转染MDCK细胞系,获得了E3区缺失的重组病毒CAV-2-ΔE3(NF)。通过病毒的形态学观察,血凝性、生长特性、感染性实验证明,该重组病毒与母源病毒没有差异。重组病毒CAV-2-ΔE3(NF)可以作为载体表达外源基因,其外源基因插入片段不小于3.3kb。

关 键 词:犬2型腺病毒    E3区    重组病毒    载体

Construction of a Transfer Vector Based on Canine Adenovirus Type-2
LI Zhong,ZHANG Shou-Feng,CUI Yan,WANG Xiao-Hu,LIU Ye and HU Rong-Liang.Construction of a Transfer Vector Based on Canine Adenovirus Type-2[J].Acta Microbiologica Sinica,2007,23(2).
Authors:LI Zhong  ZHANG Shou-Feng  CUI Yan  WANG Xiao-Hu  LIU Ye and HU Rong-Liang
Institution:Military Veterinary Institute, Academy of Military Medical Sciences, PLA, Changchun 130062, China;College of Animal Science and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China;Military Veterinary Institute, Academy of Military Medical Sciences, PLA, Changchun 130062, China;Military Veterinary Institute, Academy of Military Medical Sciences, PLA, Changchun 130062, China;Military Veterinary Institute, Academy of Military Medical Sciences, PLA, Changchun 130062, China;College of Animal Science and Veterinary Medicine, Jilin University, Changchun 130062, China;Military Veterinary Institute, Academy of Military Medical Sciences, PLA, Changchun 130062, China;Military Veterinary Institute, Academy of Military Medical Sciences, PLA, Changchun 130062, China
Abstract:
Keywords:canine adenovirus type-2  E3 region  recombinant virus  vector
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