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| 金龟子绿僵菌中性海藻糖酶基因的克隆及其表达特性分析 | |
| 引用本文： | 胡宗利,王中康,彭国雄,殷幼平,夏玉先.金龟子绿僵菌中性海藻糖酶基因的克隆及其表达特性分析[J].微生物学报,2005,45(6):890-894. |
| 作者姓名： | 胡宗利 王中康 彭国雄 殷幼平 夏玉先 |
| 作者单位： | 1. 重庆大学基因工程研究中心,重庆,400030;重庆大学生物工程学院生物力学与组织工程教育部重点实验室,重庆,400030 2. 重庆大学基因工程研究中心,重庆,400030;重庆大学生物工程学院生物力学与组织工程教育部重点实验室,重庆,400030;重庆市杀杀虫真菌工程技术中心,重庆,400030 3. 重庆大学生物工程学院生物力学与组织工程教育部重点实验室,重庆,400030 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(30170630)，重庆市自然科学基金重点项目(8564)~~ |
| 摘 要： | 根据中性海藻糖酶NTL基因的同源序列设计引物,PCR扩增出杀蝗专一菌株———金龟子绿僵菌CQMa102NTL基因片段,利用5′_RACE和3′_RACE扩增出NTLcDNA的5′和3′端序列,经拼接得到CQMa102NTL基因cDNA全长。根据其全长cDNA序列,设计引物PCR扩增出CQMa102NTL的完整基因。为了解该基因的上游调控信息,采用PanhandlePolymeraseChainReactionAmplification方法扩增其上游序列。序列分析表明,CQMa102NTL全长DNA3484bp,cDNA全长2385bp,编码737个氨基酸的蛋白,推测蛋白分子量为83.1kD;含有3个内含子,包含一个依赖于cAMP的磷酸化作用位点(RRGS)和一个钙附着位点(DTDGNMQITIED);上游序列含有一个压力反应元件(CCCCT);与金龟子绿僵菌广谱性菌株ME1NTL的核苷酸序列和氨基酸序列分别具有93%和99%同源性,由此确定该序列为金龟子绿僵菌中性海藻糖酶基因序列。Southern杂交表明,NTL基因在CQMa102基因组中为单拷贝。Northern杂交表明,NTL基因转录出约2.5kb的mRNA单带,在液体培养条件下,对数生长前期表达水平最高,对数生长后期降到最低,进入稳定生长期后表达水平又有所提高。金龟子绿僵菌CQMa102中性海藻糖酶基因DNA全长和cDNA全长登录GenBank,登录号分别为:AY557613,AY557612。 |
| 关 键 词： | 金龟子绿僵菌 中性海藻糖酶 蝗虫 昆虫病原真菌 |
| 文章编号： | 0001-6209（2005）06-0890-05 |
| 收稿时间： | 2005-03-11 |
| 修稿时间： | 2005-07-20 |
Cloning and characterization of the neutral trehalase gene in Metarhizium anisopliae CQMa102 |
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| HU Zong-Li,WANG Zhong-Kang,PENG Guo-Xiong,YIN You-Ping,XIA Yu-Xian,CAI Shao-xi.Cloning and characterization of the neutral trehalase gene in Metarhizium anisopliae CQMa102[J].Acta Microbiologica Sinica,2005,45(6):890-894. | |
| Authors: | HU Zong-Li WANG Zhong-Kang PENG Guo-Xiong YIN You-Ping XIA Yu-Xian CAI Shao-xi |
| Institution: | Genetic Engineering Research Center, Key Laboratory of Biomechanics & Tissue Engineering, Ministry of Education, Chongqing University, Chongqing 400030, China. huzongli71@yahoo.com.cn |
| Abstract: | |
| Keywords: | Metarhizium anisopliae Neutral trehalase Locust Insect pathogenic fungus |
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