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粗毛栓菌诱变菌株SAH-12漆酶基因的克隆与序列分析
引用本文:黄乾明,谢君,杨婉身.粗毛栓菌诱变菌株SAH-12漆酶基因的克隆与序列分析[J].微生物学报,2007,26(1):97-105.
作者姓名:黄乾明  谢君  杨婉身
作者单位:四川农业大学生命科学与理学院 雅安 625014;华南农业大学测试中心 广州 510642;四川农业大学生命科学与理学院 雅安 625014
基金项目:四川省教育厅重点科研项目(2002A009,2004A026);四川省科学技术厅应用基础项目(04JY029-032)
摘    要:粗毛栓菌Trametes gallica诱变菌株SAH-12是通过紫外诱变选育得到的漆酶高产菌株。为了对其漆酶基因进行研究和利用,采用cDNA末端快速扩增(Rapid Amplification of cDNA Ends,RACE)技术,从T.gallica诱变菌株SAH-12分离得到漆酶基因全长cDNA Lacc1(GenBank accession No.DQ431716)及其对应的结构基因Lac1(DQ431715)。该基因属于真菌漆酶基因家族,与来自出发菌T.gallica漆酶基因lacA(AY875867)在成熟肽编码区的同源性最高(一致性为98%)。Lacc1全长1891bp,由40bp的5'-UTR、1554bp的完整ORF和297bp的3'-UTR构成,具有polyA加尾信号AATACA和59bp的polyA结构;其完整ORF可编码21个氨基酸残基组成的信号肽和496个氨基酸残基组成的成熟蛋白。在Lacc1基因的推导氨基酸序列中有4个潜在的N-糖基化位点和4个参与二硫键形成的Cys残基,且含有真菌漆酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型铜离子结合区的4个高度保守序列。结构基因Lac1全长2338bp,含10个内含子和11个外显子,各内含子长度在51bp~76bp之间,且其序列均符合5'-gt…ag-3'规则。

关 键 词:cDNA    RACE    分子克隆

Cloning and sequence analysis of a laccase gene from mutated strain SAH-12 of Trametes gallica
HUANG Qian-Ming,XIE Jun and YANG Wan-Shen.Cloning and sequence analysis of a laccase gene from mutated strain SAH-12 of Trametes gallica[J].Acta Microbiologica Sinica,2007,26(1):97-105.
Authors:HUANG Qian-Ming  XIE Jun and YANG Wan-Shen
Institution:College of Life Sciences; Sichuan Agricultural University; Yaan; Sichuan; 625014;Instrumental Analysis & Research Center; South China Agricultural University; Guangzhou; 510642;College of Life Sciences; Sichuan Agricultural University; Yaan; Sichuan; 625014
Abstract:
Keywords:cDNA  RACE  molecular cloning
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