苏云金芽胞杆菌3-羟基丁酮代谢基因簇的转录调控

摘要:【目的】通过分析苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)3-羟基丁酮代谢基因簇aco的转录调控和acoR突变体的表型特征，明确aco基因簇的转录调控机制和对芽胞产量及Cry蛋白产量的影响。【方法】通过生物信息学方法分析aco基因簇的结构，RT-PCR分析基因簇的转录单元，采用同源重组技术敲除苏云金芽胞杆菌HD73菌株的acoR 基因，利用启动子融合lacZ的方法分析启动子的转录活性。利用总蛋白定量确定Cry1Ac蛋白产量。【结果】aco基因簇由acoABCL 4个基因组成，形成一个转录单元。aco基因簇的启动子PacoA转录活性在sigL(编码Sigma 54因子)和acoR突变体中均明显降低。acoR基因的缺失对菌体生长和Cry1Ac蛋白产量无显著影响，但使菌体运动能力减弱，使芽胞产量略有下降，并且不能利用3-羟基丁酮。【结论】aco操纵子受Sigma 54控制，并由AcoR激活，aocR基因的缺失影响菌体对3-羟基丁酮的利用，但对Cry蛋白产量无显著影响。