普通脱硫弧菌D-2氢化酶的提纯与性质

从全国土壤腐蚀网站长辛店分离纯化到－株氢化酶活性较高的菌株D-2。经鉴定为普通脱硫弧菌(Desulfovibrio vulgaris)。该菌氢化酶主要位于菌体的周质空间。 用pH9．0的0．1mmol／L Tris—EDTA缓冲液将酶洗脱，经硫酸铵沉淀、DEAE-纤维素和sepbadex G-150柱层析纯化，酶活力达到205μmolH2·min-1·mg蛋白-1，得率为17．6％，纯化33．1倍。经SDS—PAGE和梯度-PAGE测定，该酶为一条肽链，分子量49 000道尔顿。该酶吸收光谱具有铁硫蛋白特征．Ε400nm和8 280Nm分别为34．8mM-1·cm-1和120mM-1·cm-1，每个酶分子含有12个铁原子和11个硫原子。N-溴代丁二酰胺完全抑制酶活力，Hg2+件的抑制率也达54％，但该酶对巯基封闭性试剂具有抗性。