嗜热真菌 Thermomyces lanuginosus热稳定a—淀粉酶的纯化及特性 |
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引用本文: | 李多川,杨依军,彭友良,沈崇尧,周培瑾,黄亦存.嗜热真菌 Thermomyces lanuginosus热稳定a—淀粉酶的纯化及特性[J].微生物学报,1997(2). |
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作者姓名: | 李多川 杨依军 彭友良 沈崇尧 周培瑾 黄亦存 |
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作者单位: | 中国农业大学植病系,中国农业大学植病系,中国农业大学植病系,中国农业大学植病系,中国科学院微生物研究所,中国科学院微生物研究所 北京 100094,北京 100094,北京 100094,北京 100094,北京 100080,北京 100080 |
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基金项目: | 国家教育委员会高等学校博士点基金资助。 |
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摘 要: | 嗜热真菌Thermomyces lanuginosus在液体培养基中于50℃静止培养14d,培养液经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Toyopearl离子交换层析、Butyl-Toyopearl疏水层析、SephacrylS-300分子筛层析和FPLC MonoQ离子交换层析,得到了凝胶电泳均一的淀粉酶。纯酶与淀粉反应不同时间后,用碘色反应法和DNS法测定淀粉和还原糖量,结果显示淀粉量在开始时迅速下降,但还原糖的量却增加很慢;产物经TLC层析分析为麦芽糖和少量葡萄糖。由此说明它为α-淀粉酶。用SDS-PAGE和Sephacryl S-300分子筛层析测定分子量为56000,不具亚基。酶反应最适温度和pH分别为65℃和4.5~5.0。在pH4.6条件下,酶在50℃是稳定的;60℃保温1h,仍保留94%的原酶活性;酶在70℃的半衰期为10min。钙离子对酶有激活作用。酶对糖原和糊精有一定的水解能力。
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关 键 词: | 嗜热真菌 Thermomyces lanuginosus α-淀粉酶 |
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