| GL-7-ACA酰化酶的分离纯化及性质研究北大核心 |
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| 引用本文： | 周宏伟,魏中荻.GL-7-ACA酰化酶的分离纯化及性质研究北大核心[J].微生物学报,1997,37(3):196-202. |
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| 作者姓名： | 周宏伟 魏中荻 |
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| 作者单位： | 中国科学院上海植物生理研究所，中国科学院上海植物生理研究所，中国科学院上海植物生理研究所，中国科学院上海植物生理研究所 上海 200032，上海 200032，上海 200032，上海 200032 |
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| 摘 要： | CU334是高表达GL-7-ACA酰化酶工程菌,其菌悬液用超声波处理后,经硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sephadex A-50离子交换柱层析、DEAE—纤维素DE-52柱层析、Sephadex G-200凝胶过滤及羟基磷灰石吸附柱层析等步骤,得到了凝胶电泳均一的GL-7-ACA酰化酶蛋白,纯化了22倍,得率4.0％,比活力为13.8U/mg。用浓度梯度PAGE测得GL-7-ACA酰化酶的分子量为134kD,用SDS-PAGE测得两个亚基分子量分别为15.5kD和58.4kD。用PI法测得等电点为3.5。GL-7-ACA酰化酶反应最适pH为7.0。反应最适温度为37℃,GL-7-ACA酰化酶对底物GL-7-ACA的K_m值为0.50mmol/L,V_(max)为13.10U·mg^(-1)。Ca^(2+)、EDTA和巯基乙醇对该酶有激活作用,Cu^(2+)、Fe^(2+)和Mg^(2+)等有一定程度的抑制作用。产物7-ACA、戊二酸均为GL-7-ACA酰化酶的反竞争性抑制剂,其K_1值分别为16.58mmol·L^(-1)和9.88mmol·L^(-1)。
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| 关 键 词： | 酰化酶 GL-7-ACA酰化酶 纯化 性质 CU334 GL-7-ACA acylase Purification and properties |
STUDIES ON PURIFICATION AND PROPERTIES OF GL-7-ACA ACYLASE FROM CU334 |
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| Zhou Hongwei Wei Zhongdi Yang Yunliu Jiao Ruishen.STUDIES ON PURIFICATION AND PROPERTIES OF GL-7-ACA ACYLASE FROM CU334[J].Acta Microbiologica Sinica,1997,37(3):196-202. |
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| Authors: | Zhou Hongwei Wei Zhongdi Yang Yunliu Jiao Ruishen |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | CU334 GL-7-ACA acylase Purification and properties |
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