鼠疫菌OxyR调控子蛋白对dps的转录调控机制 |
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引用本文: | 倪斌,张义全,黄新祥,杨瑞馥,周冬生.鼠疫菌OxyR调控子蛋白对dps的转录调控机制[J].微生物学报,2013,53(7):685-690. |
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作者姓名: | 倪斌 张义全 黄新祥 杨瑞馥 周冬生 |
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作者单位: | 1. 江苏大学基础医学与医学技术学院,镇江,212013 2. 军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京 100071 |
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基金项目: | 病原微生物生物安全国家重点实验室开放研究基金资助项目(SKLPBS1112);江苏大学高级专业人才科研启动基金项目(10JDG044);江苏省高校自然科学研究项目(12KJD310001) |
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摘 要: | 目的]利用分子生物学实验研究鼠疫菌调控子OxyR对dps的转录调控机制.方法]提取鼠疫菌野生株(WT)和oxyR突变株(ΔoxyR)的总RNA,采用引物延伸实验研究dps的转录起始位点,并根据产物的丰度判断OxyR对dps的调控关系.进一步采用实时定量RT-PCR的方法验证OxyR对dps的调控关系.PCR扩增dps的整个启动子区DNA序列,并纯化His-OxyR蛋白,通过凝胶阻滞实验(EMSA)验证OxyR对dps启动子区是否具有直接的相互作用.利用大肠杆菌OxyR识别基序,预测鼠疫菌OxyR对dps启动子区的结合位点,从而得出鼠疫菌OxyR对dps的转录调控机制.结果]鼠疫菌dps有一个转录起始位点G(-40)(翻译起始位点为+1),其转录表达受OxyR的激活;体外实验及生物信息学预测结果表明OxyR能结合到dps启动子区-111到-78之间的碱基上.结论]OxyR能直接结合到dps启动子区而激活其转录表达.
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关 键 词: | 鼠疫菌 OxyR dps 转录调控 |
收稿时间: | 2013/1/27 0:00:00 |
修稿时间: | 2013/3/18 0:00:00 |
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