| 蓝状菌(Talaromyces leycettanus JCM12802)高温果胶甲酯酶PmeT在毕赤酵母中的高效表达及酶学性质 |
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| 引用本文： | 华婷,李雅楠,王凯凯,涂涛,黄火清,罗会颖,姚斌.蓝状菌(Talaromyces leycettanus JCM12802)高温果胶甲酯酶PmeT在毕赤酵母中的高效表达及酶学性质[J].微生物学报,2018,58(1):122-130. |
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| 作者姓名： | 华婷 李雅楠 王凯凯 涂涛 黄火清 罗会颖 姚斌 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院饲料研究所, 北京 100081,广州医科大学-中国科学院广州生物医药与健康研究联合生命科学学院, 广东 广州 510006,中国农业科学院饲料研究所, 北京 100081,中国农业科学院饲料研究所, 北京 100081,中国农业科学院饲料研究所, 北京 100081,中国农业科学院饲料研究所, 北京 100081,中国农业科学院饲料研究所, 北京 100081 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划（2014AA021301） |
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| 摘 要： | 【目的】在毕赤酵母中高水平表达蓝状菌(Talaromyces leycettanus JCM12802)来源的高温果胶甲酯酶,并对其进行酶学性质研究,具有高催化效率的高温果胶甲酯酶有望能广泛应用于低甲氧基果胶的生产,优化生产工艺,提高转化率,降低生产成本。【方法】利用RT-PCR的方法,以蓝状菌(T.leycettanus JCM12802)总RNA为模板,克隆得到果胶甲酯酶基因(Pme T)的cDNA。将其插入表达载体p PIC9K,并转化毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株GS115,高活性的阳性转化子进行高密度发酵研究。【结果】重组酵母的果胶甲酯酶表达水平达到428 U/m L,并进一步鉴定了重组果胶甲酯酶的酶学性质。该酶的最适反应温度为75°C,且在85°C以下具有较好的热稳定性。最适反应p H为4.0,在p H 2.0-7.0之间有较好的稳定性。【结论】用重组毕赤酵母可高效表达蓝状菌来源的高温果胶甲酯酶,为其今后在工业上的应用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 果胶 果胶甲酯酶 高温真菌 毕赤酵母 |
| 收稿时间： | 2017/2/9 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/3/16 0:00:00 |
High-level expression and characterization of pectin methylesterase PmeT from Talaromyces leycettanus JCM12802 in Pichia pastoris |
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| Ting Hu,Yanan Li,Kaikai Wang,Tao Tu,Huoqing Huang,Huiying Luo and Bin Yao.High-level expression and characterization of pectin methylesterase PmeT from Talaromyces leycettanus JCM12802 in Pichia pastoris[J].Acta Microbiologica Sinica,2018,58(1):122-130. |
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| Authors: | Ting Hu Yanan Li Kaikai Wang Tao Tu Huoqing Huang Huiying Luo and Bin Yao |
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| Institution: | Institute of Feed Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,College of Life Science, Guangzhou Institutes of Biomedicine and Health, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou Medical University, Guangzhou 510006, Guangdong Province, China,Institute of Feed Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Institute of Feed Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Institute of Feed Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China,Institute of Feed Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China and Institute of Feed Research, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | pectin pectin methylesterase high temperature fungi Pichia pastoris |
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