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苏云金芽胞杆菌spoIIID基因缺失突变株的特点
引用本文:张茜茜,束长龙,张杰,黄大昉,宋福平.苏云金芽胞杆菌spoIIID基因缺失突变株的特点[J].微生物学报,2009,49(9):1165-1170.
作者姓名:张茜茜  束长龙  张杰  黄大昉  宋福平
作者单位:中国农业科学院植物保护所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100193;中国农业科学院植物保护所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100193;中国农业科学院植物保护所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100193;中国农业科学院生物技术研究所,北京 100081;中国农业科学院植物保护所植物病虫害生物学国家重点实验室,北京 100193
基金项目:国家“973”项目(2009CB118902)和863计划项目(2006AA10A212)
摘    要:摘要:【目的】构建苏云金芽胞杆菌spoIIID基因缺失突变株,并研究其与出发菌株的表型及性质差异。【方法】采用基因同源重组技术敲除了苏云金芽胞杆菌HD-73菌株中的spoIIID基因,构建了spoIIID缺失突变株,测定生长曲线,并通过扫描电子显微镜观察,芽胞计数分析及SDS-PAGE 蛋白电泳比较突变株与出发菌株的差异。构建遗传互补菌株,观察菌株性状的回复情况。【结果】通过温敏载体同源重组敲除技术获得了苏云金芽胞杆菌HD-73菌株spoIIID基因缺失突变株,生长曲线测定表明,突变株较出发菌株在平稳期后期生长较缓和;扫描电子显微镜观察和芽胞计数分析显示,突变株基本丧失了形成芽胞的能力,但依然形成晶体。SDS-PAGE结果显示,在 SSM培养基中,突变株对伴胞晶体蛋白的形成量影响并不显著;在营养较富集的Luria-Bertani培养基中,突变株中伴胞晶体蛋白的形成量较野生型和互补株明显降低。利用载体pHT315携带spoIIID操纵子互补突变株,互补株恢复了产生晶体和芽胞的能力。【结论】本研究证明spoIIID基因是苏云金芽胞杆菌芽胞形成所必需,同时与晶体蛋白的表达相关。

关 键 词:关键词:苏云金芽胞杆菌  芽胞  杀虫晶体蛋白  spoIIID基因  突变
收稿时间:2009/4/23 0:00:00
修稿时间:2009/5/20 0:00:00

Characterization of Bacillus thuringiensis spoIIID gene Mutantation
Qianqian Zhang,Changlong Shu,Fuping Song,Jie Zhang and Dafang Huang.Characterization of Bacillus thuringiensis spoIIID gene Mutantation[J].Acta Microbiologica Sinica,2009,49(9):1165-1170.
Authors:Qianqian Zhang  Changlong Shu  Fuping Song  Jie Zhang and Dafang Huang
Institution:State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China;State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China;State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China;Btotechnology Research Institute, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China;State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect Pests, Institute of Plant Protection, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China
Abstract:
Keywords:Key words: Bacillus thuringiensis  spoIIID  spore  crystal protein
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