| 水稻白叶枯病抗性基因Xa21和稻瘟病抗性基因Pi-d2激酶蛋白质在毕赤酵母中的表达及条件优化 |
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| 引用本文： | 李晓明,王书利,李莉云,李晓兵,王静,刘国振.水稻白叶枯病抗性基因Xa21和稻瘟病抗性基因Pi-d2激酶蛋白质在毕赤酵母中的表达及条件优化[J].微生物学报,2010,50(5):641-646. |
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| 作者姓名： | 李晓明 王书利 李莉云 李晓兵 王静 刘国振 |
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| 作者单位： | 河北农业大学生命科学学院，保定 071001;河北农业大学生命科学学院，保定 071001;河北农业大学生命科学学院，保定 071001;中国科学院遗传与发育生物学研究所，北京 100101;中国科学院遗传与发育生物学研究所，北京 100101;河北农业大学生命科学学院，保定 071001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（No. 30670175, 30730007） |
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| 摘 要： | 【目的】白叶枯病和稻瘟病是最主要的水稻病害,Xa21是水稻白叶枯病抗性基因,Pi-d2是稻瘟病抗性基因,二者都编码类受体激酶蛋白质。本研究旨在毕赤酵母系统中表达XA21和PI-D2激酶蛋白质。【方法】用Xa21和Pi-d2的激酶区PCR产物,构建了pPICZαA-Xa21K、pPICZαA-Pi-d2K重组质粒,酶切及测序验证后,将重组质粒线性化,转化到毕赤酵母菌株中,系统地比较了不同酵母菌株(KM71、GS115、X33),不同甲醇浓度(1%、2%、3%),不同pH(pH5、pH6、pH7、pH8)值,不同诱导时间(24h、48h、72h)条件下激酶蛋白质的表达情况。【结果】XA21和PI-D2激酶蛋白质可以在毕赤酵母中表达,但表达的蛋白质不能分泌到培养基上清中,而只能在菌体中检测到,对表达条件的系统比较发现,毕赤酵母菌株KM71和X33、2%的甲醇诱导浓度、pH5和48h以上的诱导时间有利于激酶蛋白质的表达,最后我们在酵母裂解物上清中获得了纯化的考染可见的激酶蛋白质。【结论】在毕赤酵母中表达了XA21和PI-D2激酶蛋白质,为下一步生化特性研究奠定了基础。
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| 关 键 词： | 关键词: 水稻 白叶枯病 稻瘟病 抗病基因 毕赤酵母 蛋白质表达 |
| 收稿时间： | 2009/10/18 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2010/1/22 0:00:00 |
Expression optimization of rice bacterial blight resistance gene Xa21 and blast resistance gene Pi-d2 protein kinases in Pichia Pastoris |
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| Xiaoming Li,Shuli Wang,Liyun Li,Xiaobing Li,Jing Wang and Guozhen Liu.Expression optimization of rice bacterial blight resistance gene Xa21 and blast resistance gene Pi-d2 protein kinases in Pichia Pastoris[J].Acta Microbiologica Sinica,2010,50(5):641-646. |
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| Authors: | Xiaoming Li Shuli Wang Liyun Li Xiaobing Li Jing Wang and Guozhen Liu |
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| Institution: | College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071001, China;College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071001, China;College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071001, China;Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;Institute of Genetics and Developmental Biology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China;College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding 071001, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Keywords: rice bacterial blight rice blast disease resistance gene Pichia pastoris yeast protein expression |
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