| 小鼠体内SEG蛋白靶向运送shRNA抑制狂犬病毒复制 |
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| 引用本文： | 杨瑞梅,王化磊,郑学星,单虎,杨松涛,夏咸柱.小鼠体内SEG蛋白靶向运送shRNA抑制狂犬病毒复制[J].微生物学报,2016,56(1):78-87. |
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| 作者姓名： | 杨瑞梅 王化磊 郑学星 单虎 杨松涛 夏咸柱 |
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| 作者单位： | 青岛农业大学动物科技学院, 山东青岛 266109,军事医学科学院军事兽医研究所, 吉林长春 130122;吉林省人畜共患病预防与控制重点实验室, 吉林长春 130122,军事医学科学院军事兽医研究所, 吉林长春 130122;吉林省人畜共患病预防与控制重点实验室, 吉林长春 130122,青岛农业大学动物科技学院, 山东青岛 266109,军事医学科学院军事兽医研究所, 吉林长春 130122;吉林省人畜共患病预防与控制重点实验室, 吉林长春 130122,军事医学科学院军事兽医研究所, 吉林长春 130122;吉林省人畜共患病预防与控制重点实验室, 吉林长春 130122 |
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| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项(201103032,201303042) |
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| 摘 要： | 【目的】本试验前期已经证实,用单链抗体(sc Fv)-绿脓杆菌跨膜区(ETA)-酵母DNA结合结构域(GAL4)表达的蛋白(简写为SEG蛋白),SEG能与含sh RNA(short hairpin RNA)的质粒(p RNATU6.3-sh RNA)结合形成复合物SEG-sh RNA,并靶向运送该质粒进入感染狂犬病毒(Rabies virus,RV)的细胞,抑制RV复制。本研究用感染狂犬病病毒的小鼠模型,进行SEG-sh RNA复合物小鼠体内靶向性运送si RNA(short interfering RNA)和抑制RV复制的研究。【方法】用已建立RV CVS-24株小鼠肌肉注射模型进行试验。取50 LD_(50) CVS-24攻毒,在攻毒后12 h尾静脉注射SEG-sh RNA,流式细胞仪检测SEG-sh RNA的体内靶向性;同样方法攻毒后,尾静脉注射SEG-sh RNA,连续4 d,攻毒后第5天小鼠脑组织用q RT-PCR、RT-PCR、Western blot、免疫荧光染色法检测其中RV的含量;统计小鼠存活率;并检测小鼠体内IFN-α含量,从而分析SEG-sh RNA在体内的抗病毒作用。【结果】结果表明仅在RV攻毒小鼠的注射部位检测到绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的表达,未注射RV的腿部及脑、肝、脾、肾均无GFP表达,说明SEG-sh RNA可靶向RV感染细胞运送sh RNA。攻毒后第5天脑组织q RT-PCR结果表明靶向药物组比病毒对照减少4.88倍(3.9/0.8);RT-PCR、Western blot、免疫荧光染色试验结果表明使用SEG-sh RNA组病毒量明显少于病毒对照组;且攻毒后13 d,动物存活率达50%,而病毒对照100%死亡。检测小鼠体内IFN-α未见升高。【结论】以上试验表明SEG蛋白在小鼠体内靶向运送含sh RNA的质粒到感染组织细胞;对小鼠体内RV有明显抑制作用,因此可以用于狂犬病毒感染的特异辅助性救治研究。
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| 关 键 词： | 狂犬病毒 shRNA 靶向传递 小鼠 动物模型 |
| 收稿时间： | 5/7/2015 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 2015/5/27 0:00:00 |
Targeted inhibition of Rabies virus gene expression by a chimeric multidomain protein mediated shRNA delivery |
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| Ruimei Yang,Hualei Wang,Xuexing Zheng,Hu Shan,Songtao Yang and Xianzhu Xia.Targeted inhibition of Rabies virus gene expression by a chimeric multidomain protein mediated shRNA delivery[J].Acta Microbiologica Sinica,2016,56(1):78-87. |
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| Authors: | Ruimei Yang Hualei Wang Xuexing Zheng Hu Shan Songtao Yang and Xianzhu Xia |
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| Institution: | College of Animal Science and Veterinary Medicine, Qingdao Agriculture University, Qingdao 266109, Shandong Province, China,Institution of Military Veterinary, Academy of Military Medical Sciences, Changchun 130122, Jilin Province, China;Jilin Province Key Laboratory for Disease Prevention and Control, Changchun 130122, Jilin Province, China,Institution of Military Veterinary, Academy of Military Medical Sciences, Changchun 130122, Jilin Province, China;Jilin Province Key Laboratory for Disease Prevention and Control, Changchun 130122, Jilin Province, China,College of Animal Science and Veterinary Medicine, Qingdao Agriculture University, Qingdao 266109, Shandong Province, China,Institution of Military Veterinary, Academy of Military Medical Sciences, Changchun 130122, Jilin Province, China;Jilin Province Key Laboratory for Disease Prevention and Control, Changchun 130122, Jilin Province, China and Institution of Military Veterinary, Academy of Military Medical Sciences, Changchun 130122, Jilin Province, China;Jilin Province Key Laboratory for Disease Prevention and Control, Changchun 130122, Jilin Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Rabies virus short hairpin RNA targeting delivery mice animal model |
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