| 四川盆地生态区苏云金芽胞杆菌cry基因的鉴定及新型模式cry基因的克隆 |
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| 引用本文： | 朱军,谭芙蓉,余秀梅,关鹏,唐杰,王世全,郑爱萍,李平.四川盆地生态区苏云金芽胞杆菌cry基因的鉴定及新型模式cry基因的克隆[J].微生物学报,2009,49(3):324-330. |
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| 作者姓名： | 朱军 谭芙蓉 余秀梅 关鹏 唐杰 王世全 郑爱萍 李平 |
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| 作者单位： | 1. 四川农业大学水稻研究所,温江,611130;西南作物基因资源与遗传改良教育部重点实验室,四川农业大学,雅安,625014
2. 上海市农业科学院生物技术研究所,上海,201106 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划) |
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| 摘 要： | 目的]为了明确四川盆地生态区土壤中苏云金芽胞杆菌cry,基因资源情况,进一步克隆出新型的杀虫晶体蛋白基因.方法]本研究主要通过菌株晶体形状的光学显微镜及扫描电镜观察、PCR-RFLP技术鉴定cry基因型法、杀虫晶体蛋白的SDS-PAGE分析和菌株生物活性测定等方法对此地区菌株进行研究.结果]从四川盆地不同生态区采集2650份土壤样品中分离了791株苏云金芽胞杆菌.PCR-RFLP鉴定结果表明:此地区的苏云金芽胞杆菌主要含有cry1,cry2,cry3,cry4/10,cry9,cry30和cry40等7种cry,基因类型;含cry1基因的菌株最丰富,共有21种不同cry1型基因组合;从中发现了新型模式基因,并采用Tail-PCR技术获得了其中3个基因的全长序列,被国际苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因命名委员会命名为cry54Aa1、cry30Fa1和cry30Ga1.通过生物活性测定,发现对鳞翅目和双翅目害虫具毒力的菌株.未鉴定出基因型的80个菌株的伴胞晶体SDS-PAGE分析表明:这些菌株均有40～130 kDa蛋白表达,极有可能含新型的杀虫蛋白基因.结论]研究结果充分体现了四川盆地生态区苏云金芽胞杆菌资源的多样性及特殊性,所蕴含的杀虫蛋白基因在农业生产上具有重要意义和应用前景.
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| 关 键 词： | 苏云金芽胞杆菌 cry基因 模式基因 杀虫活性 |
| 收稿时间： | 2008/11/13 0:00:00 |
Characterization of insecticidal crystal Protein cry gene of Bacillus thuringiensis from soil of Sichuan Basin and cloning of novel holotype cry gene |
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| Jun Zhu,Furong Tan,Xiumei Yu,Peng Guan,Jie Tang,Shiquan Wang,Aiping Zheng and Ping Li.Characterization of insecticidal crystal Protein cry gene of Bacillus thuringiensis from soil of Sichuan Basin and cloning of novel holotype cry gene[J].Acta Microbiologica Sinica,2009,49(3):324-330. |
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| Authors: | Jun Zhu Furong Tan Xiumei Yu Peng Guan Jie Tang Shiquan Wang Aiping Zheng and Ping Li |
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| Institution: | Rice Research Institute, Sichuan Agricultural University, Wenjiang, Sichuan 611130, China;Biotechnology Research Institute, Shanghai Academy of Agriculture Sciences, Shanghai 201106, China;Rice Research Institute, Sichuan Agricultural University, Wenjiang, Sichuan 611130, China;Rice Research Institute, Sichuan Agricultural University, Wenjiang, Sichuan 611130, China;Rice Research Institute, Sichuan Agricultural University, Wenjiang, Sichuan 611130, China;Rice Research Institute, Sichuan Agricultural University, Wenjiang, Sichuan 611130, China;Rice Research Institute, Sichuan Agricultural University, Wenjiang, Sichuan 611130, China;Rice Research Institute, Sichuan Agricultural University, Wenjiang, Sichuan 611130, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | PCR-RFLP SDS-PAGE |
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