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鼠伤寒沙门菌SL1344株环化腺苷酸合成酶缺失株平衡致死系统的构建及其雏鸡免疫保护试验
引用本文:李静,陈松彪,余祖华,何雷,李小康,贾艳艳,郁川,张春杰,程相朝,李银聚,吴庭才,赵战勤.鼠伤寒沙门菌SL1344株环化腺苷酸合成酶缺失株平衡致死系统的构建及其雏鸡免疫保护试验[J].微生物学报,2015,55(7):942-948.
作者姓名:李静  陈松彪  余祖华  何雷  李小康  贾艳艳  郁川  张春杰  程相朝  李银聚  吴庭才  赵战勤
作者单位:河南省动物疫病与公共安全院士工作站,河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003,河南省动物疫病与公共安全院士工作站,河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003,河南省动物疫病与公共安全院士工作站,河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003,河南省动物疫病与公共安全院士工作站,河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003,河南省动物疫病与公共安全院士工作站,河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003,河南省动物疫病与公共安全院士工作站,河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003,河南省动物疫病与公共安全院士工作站,河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003,河南省动物疫病与公共安全院士工作站,河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003,河南省动物疫病与公共安全院士工作站,河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003,河南省动物疫病与公共安全院士工作站,河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003,河南省动物疫病与公共安全院士工作站,河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003,河南省动物疫病与公共安全院士工作站,河南科技大学动物疫病与公共卫生重点实验室,河南洛阳471003
基金项目:河南科技大学博士启动基金项目(09001580);河南科技大学青年科学基金项目(2012QN009);河南省高等学校重点科研项目(15A230010)
摘    要:摘要:【目的】为构建鼠伤寒沙门菌环化腺苷酸合成酶缺失株平衡致死系统,并对其生物学特性进行检测。【方法】以鼠伤寒沙门菌SL1344Δcya株为亲本株,利用重组自杀性质粒(pREΔasd)介导的同源重组技术,经两步法缺失并筛选asd基因缺失株(SL1344Δcya Δasd)。将含asd基因且无抗性的pYA3493质粒电转化至缺失株SL1344ΔcyaΔasd,构建重组菌株SL1344ΔcyaΔasd (pYA3493)。【结果】试验结果表明,重组菌株SL1344ΔcyaΔasd(pYA3493)生化特性和生长速度与参考株SL1344相比差异较大,与亲本株SL1344Δcya基本一致,SL1344ΔcyaΔasd(pYA3493)失去了利用麦芽糖、乳糖、山梨醇等碳源的能力,也不能分解H2 S、半乳糖和鼠李糖,但仍保留了利用葡萄糖的能力。对1日龄雏鸡攻毒试验表明,SL1344ΔcyaΔasd(pYA3493)毒力较参考株SL1344降低了约104倍。免疫保护试验显示,1日龄雏鸡免疫SL1344ΔcyaΔasd(pYA3493)后第17天,利用鼠伤寒沙门菌参考株攻毒,保护率为62.5%。【结论】鼠伤寒沙门菌SL1344株环化腺苷酸合成酶缺失株平衡致死系统构建成功,且具有较好的免疫保护性,为深入研究以鼠伤寒沙门菌为载体的口服疫苗奠定基础。

关 键 词:关键词:鼠伤寒沙门菌,缺失株,asd平衡致死系统,免疫保护
收稿时间:2014/11/26 0:00:00
修稿时间:3/2/2015 12:00:00 AM
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