| 热带假丝酵母脂肪醛脱氢酶基因CtAld1和CtAld2的功能评价 |
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| 引用本文： | 王泽政,张利华,张满琪,胡世元,李莉,沈微,樊游,陈献忠.热带假丝酵母脂肪醛脱氢酶基因CtAld1和CtAld2的功能评价[J].微生物学报,2018,58(8):1492-1502. |
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| 作者姓名： | 王泽政 张利华 张满琪 胡世元 李莉 沈微 樊游 陈献忠 |
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| 作者单位： | 江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室;赢创(上海)投资管理有限公司 |
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| 基金项目： | 江苏省自然科学基金（BK20171138）；国家“863计划”（2013AA102101-5） |
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| 摘 要： | 【目的】热带假丝酵母是发酵法生产二元酸的重要工业菌株,具有较高的ω-氧化活性。脂肪醛脱氢酶在ω-氧化途径中起重要作用,催化脂肪醛生成脂肪酸,但其具体催化功能及对细胞生理影响还未被系统研究。本文通过删除脂肪醛脱氢酶基因CtAld1和CtAld2鉴定了其在ω-氧化途径中的功能。【方法】通过基因组信息挖掘获得热带假丝酵母脂肪醛脱氢酶基因CtAld1和CtAld2序列,在此基础上,通过同源重组敲除CtAld1和CtAld2基因。考察突变株的生长和胞内脂肪醛脱氢酶活性变化,并评价CtAld1和CtAld2基因敲除对细胞二元酸合成能力的影响。【结果】分别获得了热带假丝酵母突变株XZX-1(ΔCtAld1/ΔCtAld1)、XZX-2(ΔCtAld2/ΔCtAld2)和XZX-12(ΔCtAld1/ΔCtAld1,ΔCtAld2/ΔCtAld2)。在以十二烷为唯一碳源的培养基中,敲除CtAld2基因显著抑制细胞的生长,胞内脂肪醛脱氢酶活性降低为出发菌株的30%;敲除CtAld1基因尽管会使细胞损失一部分醛脱氢酶活性,但能够一定程度地提升细胞在十二烷中的生长性能。敲除CtAld1或CtAld2会降低菌株二元酸产量,组合敲除CtAld1和CtAld2严重削弱菌株十二碳二元酸的合成能力。【结论】CtAld2对热带假丝酵母细胞的生长和十二碳二元酸的合成具有重要作用,缺失CtAld1或CtAld2基因降低细胞的二元酸合成能力。CtAld1和CtAld2可作为热带假丝酵母ω-氧化途径代谢工程改造的潜在靶点。
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| 关 键 词： | 热带假丝酵母 脂肪醛脱氢酶 基因敲除 十二碳二元酸 |
| 收稿时间： | 2017/11/18 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2018/1/10 0:00:00 |
Functional identification of fatty aldehyde dehydrogenase genes CtAld1 and CtAld2 from Candida tropicalis |
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| Zezheng Wang,Lihua Zhang,Manqi Zhang,Shiyuan Hu,Li Li,Wei Shen,You Fan and Xianzhong Chen.Functional identification of fatty aldehyde dehydrogenase genes CtAld1 and CtAld2 from Candida tropicalis[J].Acta Microbiologica Sinica,2018,58(8):1492-1502. |
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| Authors: | Zezheng Wang Lihua Zhang Manqi Zhang Shiyuan Hu Li Li Wei Shen You Fan and Xianzhong Chen |
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| Institution: | Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China,Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China,Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China,Evonik(Shanghai) Investment Management Co. Ltd., Shanghai 201108, China,Evonik(Shanghai) Investment Management Co. Ltd., Shanghai 201108, China,Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China,Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China and Key Laboratory of Industrial Biotechnology, Ministry of Education, School of Biotechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, Jiangsu Province, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Candida tropicalis fatty aldehyde dehydrogenase gene disruption dodecanedioic acid |
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