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四种cry 基因启动子在spoIIID基因突变株中的活性比较
引用本文:王新梅,杜立新,彭琦,梁影屏,李杰,张杰,宋福平.四种cry 基因启动子在spoIIID基因突变株中的活性比较[J].微生物学报,2012,52(9):1075-1084.
作者姓名:王新梅  杜立新  彭琦  梁影屏  李杰  张杰  宋福平
作者单位:1. 东北农业大学生命科学学院,哈尔滨,150030
2. 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193;河北农林科学院植物保护研究所,保定071000
3. 中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京100193
基金项目:国家“973”项目(2009CB118902);国家自然基金(31070083)
摘    要:【目的】分析spoIIID基因突变对苏云金芽胞杆菌cry1、cry3、cry4和cry8基因启动子Pcry1Ac、Pcry3A、Pcry4A和Pcry8E的影响,比较以上启动子在无芽胞spoIIID基因突变体(HD-△SpoIIID)中的转录活性。【方法】分别构建了Pcry1Ac、Pcry3A、Pcry4A和Pcry8E与lacZ基因融合的转录分析载体,并导入HD-73野生型菌株和HD-△SpoIIID突变株中测定β-半乳糖苷酶活性;通过高温诱变方法在HD-△SpoIIID基础上筛选出缺失cry1Ac基因的HD--△SpoIIID突变体;构建了4种启动子与cry1Ac基因融合表达载体,分别将它们转入HD-ΔSpoIIID和HD--ΔSpoIIID中,分析Cry1Ac蛋白表达量及其生物活性。【结果】HD-73和HD-ΔSpoIIID菌株中四个启动子转录活性由高到低分别为:Pcry8E>Pcry1Ac>Pcry4A>Pcry3A;spoIIID基因的缺失未影响Pcry1Ac和Pcry8E转录活性,Pcry3A在HD-ΔSpoIIID菌株中转录活性略有升高,Pcry4A在HD-ΔSpoIIID菌株中转录活性在T5到T10略有降低。从翻译水平来看在HD-ΔSpoIIID中cry8E启动子略低于cry1Ac启动子,并高于Pcry4Aa,Pcry3A指导的Cry1Ac蛋白产量,生物活性测定结果与蛋白表达量相符。【结论】cry8E基因启动子Pcry8E在spoIIID突变体中在转录水平活性是最高的启动子,而cry1Ac启动子指导自身基因cry1Ac表达时,在翻译水平上略高于cry8E启动子指导的Cry1Ac产量。

关 键 词:苏云金芽胞杆菌  spoIIID基因突变株  cry基因启动子  转录活性  Cry蛋白表达量
收稿时间:4/5/2012 12:00:00 AM
修稿时间:5/2/2012 12:00:00 AM

Activity of four cry gene promoters in spoIIID mutant of Bacillus thuringiensis
Xinmei Wang,Lixin Du,Qi Peng,Yingping Liang,Jie Li,Jie Zhang and Fuping Song.Activity of four cry gene promoters in spoIIID mutant of Bacillus thuringiensis[J].Acta Microbiologica Sinica,2012,52(9):1075-1084.
Authors:Xinmei Wang  Lixin Du  Qi Peng  Yingping Liang  Jie Li  Jie Zhang and Fuping Song
Institution:1 College of Life Sciences,Northeast Agricultural University,Harbin 150030,China 2 State Key Laboratory for Biology of Plant Diseases and Insect pests,Institute of Plant Protection Chinese Academy of Agricultural Sciences,Beijing 100193,China 3 Institute of Plant Protection,Agricultural University of Hebei,Baoding 071001,China
Abstract:
Keywords:
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