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| 烟草花叶病毒运动蛋白cDNA的克隆及融合蛋白的表达 | |
| 引用本文： | 李艳利,马中良,林杰,田波,杨怀义.烟草花叶病毒运动蛋白cDNA的克隆及融合蛋白的表达[J].微生物学报,2004,44(2):182-184. |
| 作者姓名： | 李艳利 马中良 林杰 田波 杨怀义 |
| 作者单位： | 1. 南京医科大学分子生物学系,南京,210029;中国科学院微生物研究所分子病毒室,北京,100080 2. 中国科学院微生物研究所分子病毒室,北京,100080 3. 南京医科大学分子生物学系,南京,210029 |
| 基金项目： | 国家“973项目”(G2 0 0 0 0 162 0 5 )，江苏省博士后基金~~ |
| 摘 要： | 从烟草花叶病毒(TMV)中提取总RNA，通过反转录PCR (RTPCR) 扩增得到其运动蛋白(MP)的基因，将扩增产物克隆到pMD18T载体上。DNA序列分析表明，所得到的运动蛋白的基因全长为807bp (GenBank接受号AY300161), 与已发表TMV序列（GenBank登陆号为NC-001367）和同属的番茄花叶病毒（ToMV, GenBank登陆号为NC-002692相比核苷酸的同源性分别为98.0％和80.9％，氨基酸的同源性分别为99.1％和80.0％。 将目的片段亚克隆到表达载体pET30a上，并在大肠杆菌JM109中诱导表达，诱导9h 后，融合蛋白表达量最大。诱导后的工程菌超声后经SDSPAGE检测，融合蛋白以可溶形式存在。 |
| 关 键 词： | 烟草花叶病毒，运动蛋白，cDNA 融合蛋白表达 |
| 文章编号： | 0001-6209(2004)02-0182-03 |
| 修稿时间： | 2003年6月6日 |
Cloning of Movement Protein cDNA of Tobacco Mosaic Virus and Its Expression in Escherichia coli |
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| LI Yan-Li , MA Zhong-Liang LIN Jie TIEN Po YANG Huai-Yi.Cloning of Movement Protein cDNA of Tobacco Mosaic Virus and Its Expression in Escherichia coli[J].Acta Microbiologica Sinica,2004,44(2):182-184. | |
| Authors: | LI Yan-Li MA Zhong-Liang LIN Jie TIEN Po YANG Huai-Yi |
| Institution: | LI Yan-Li 1,2 MA Zhong-Liang 2 LIN Jie 2 TIEN Po 2 YANG Huai-Yi 2* |
| Abstract: | The movement protein gene was obtained by RT-PCR from the total RNA of tobacco mosaic virus and cloned to pMD-18T vector. Its length was 807 bp, compared with TMV and ToMV in GenBank, the identities of neucleotides and amino acids were 98.5%, 80.9% and 99.1%,80.0% respectively. The target fragment was subcloned to pET-30a, an expression vector. The fusion protein was expressed in the stain JM109 of Escherichia coli. The highest amount of expression time of the fusion protein which was solvent after sonication, was 9h after inducing. |
| Keywords: | Tobacco mosaic virus Movement protein cDNA Fusion protein expression |
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