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生防菌密旋链霉菌Act12中SPA7074缺失突变株的构建及其次级代谢产物鉴定
引用本文:段雪梅,赵飞扬,颜霞,薛泉宏,李晓霞,文冰洁,贾良辉,颜华.生防菌密旋链霉菌Act12中SPA7074缺失突变株的构建及其次级代谢产物鉴定[J].微生物学报,2016,56(12):1883-1891.
作者姓名:段雪梅  赵飞扬  颜霞  薛泉宏  李晓霞  文冰洁  贾良辉  颜华
作者单位:西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学资源环境学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100,西北农林科技大学生命科学学院, 陕西 杨凌 712100
基金项目:陕西省农业科技创新与攻关(2015NY066);上海交通大学微生物代谢国家重点实验室开放基金(MMLKF14-09);中央高校基本科研业务费(Z109021426,Z109021432);高校博士点基金(20120204120034,20120204120042)
摘    要:【目的】通过基因工程手段构建生防菌Act12转录调控因子SPA7074缺失突变株,并挖掘其中活性次级代谢产物资源和探讨其活性机理。【方法】利用同源重组方法敲除Act12基因组中可能的Tet R家族转录调控因子编码基因spa7074(accession number:KU955325),平板实验检测缺失突变株发酵液抑菌活性的变化,并通过HPLC比较代谢图谱,然后通过质谱及核磁共振对差异峰对应化合物进行结构鉴定。【结果】SPA7074缺失突变株对几种病原真菌的拮抗活性显著增强,比较代谢图谱表明出现数个差异峰,将最显著差异峰所对应化合物进行分离纯化鉴定,结果为寡霉素D。【结论】本研究通过基因工程手段敲除生防菌株Act12中的负转录调控转录因子,使得突变菌株抑菌活性显著增强,并获得了产量达野生型菌株7倍的寡霉素D高产菌株Δspa7074。

关 键 词:生防菌  密旋链霉菌Act12  TetR家族  基因中断  寡霉素D
收稿时间:2016/3/31 0:00:00
修稿时间:2016/5/13 0:00:00

Construction of SPA7074-deficient mutant of biocontrol strain Streptomyces pactum Act12 and characterization of its secondary metabolites
Xuemei Duan,Feiyang Zhao,Xia Yan,Quanhong Xue,Xiaoxia Li,Bingjie Wen,Lianghui Jia and Hua Yan.Construction of SPA7074-deficient mutant of biocontrol strain Streptomyces pactum Act12 and characterization of its secondary metabolites[J].Acta Microbiologica Sinica,2016,56(12):1883-1891.
Authors:Xuemei Duan  Feiyang Zhao  Xia Yan  Quanhong Xue  Xiaoxia Li  Bingjie Wen  Lianghui Jia and Hua Yan
Institution:College of Life Science, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China,College of Life Science, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China,College of Life Science, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China,College of Natural Resources and Environment, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China,College of Life Science, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China,College of Life Science, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China,College of Life Science, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China and College of Life Science, Northwest A & F University, Yangling 712100, Shaanxi Province, China
Abstract:
Keywords:biocontrol strain  Streptomyces pactum Act12  TetR family  gene disruption  oligomycin D
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