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日本血吸虫信号转导蛋白Sjwnt_4基因的克隆、表达及功能分析
引用本文:陶丽红,姚利晓,傅志强,冯新港,刘金明,石耀军,苑纯秀,蔡幼民,林矫矫.日本血吸虫信号转导蛋白Sjwnt_4基因的克隆、表达及功能分析[J].微生物学报,2007,23(3).
作者姓名:陶丽红  姚利晓  傅志强  冯新港  刘金明  石耀军  苑纯秀  蔡幼民  林矫矫
作者单位:中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232;中国农业科学院上海兽医研究所,国家防治动物血吸虫病专业实验室,农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海 200232
基金项目:国家自然科学基金项目(No.30600450、No.30471299和No.30671581)和上海市重大科技攻关项目(No.03DZ19231)资助。
摘    要:由Wnt基因家族产物与其它相关基因产物构成的Wnt信号通路,是细胞发育和生长调节的一个关键途径,对动物的发育特别是生殖系统的发育起重要的调节作用。在人类和小鼠中,Wnt4蛋白是性腺分化过程中主要调节因子,在胚胎发育中起着关键作用。利用RACE技术从日本血吸虫19d童虫中首次扩增到一个Wnt家族基因,序列分析表明该基因的完整编码框含1311bp,编码436个氨基酸,理论分子量49.6kD。同源性分析结果表明,该基因的氨基酸序列具有典型Wnt家族蛋白特征,与日本三角涡虫、人Wnt4的氨基酸序列相似性分别达43%、37%,推测为血吸虫的Wnt4基因,命名为Sjwnt4(GenBank登陆号DQ643829)。实时定量PCR分析显示该基因在14d童虫、19d童虫、31d虫体、44d雌虫及44d雄虫中均有表达,其中19d童虫中的表达量明显高于其它发育阶段,44d雌虫中的表达量明显高于雄虫。构建了该基因的原核表达载体pGEX_4T_2_Sjwnt4,应用大肠杆菌系统进行了表达,表达蛋白以包涵体形式存在,Western印迹显示表达产物能被日本血吸虫成虫粗抗原免疫血清所识别。Sjwnt4基因及其表达产物的获得,为探索Wnt信号通路对血吸虫发育、生殖的调节提供了重要基础。

关 键 词:日本血吸虫  信号转导  Wnt4  发育  差异表达

Cloning, Expression and Characterization of a Gene Encoding Signal Transduction Protein Wnt4 of Schistosoma japonicum
TAO Li_Hong,YAO Li_Xiao,FU Zhi_Qiang,FENG Xin_Gang,LIU Jin_Ming,SHI Yao_Jun,YUAN Chun_Xiu,CAI You_Min and LIN Jiao_Jiao.Cloning, Expression and Characterization of a Gene Encoding Signal Transduction Protein Wnt4 of Schistosoma japonicum[J].Acta Microbiologica Sinica,2007,23(3).
Authors:TAO Li_Hong  YAO Li_Xiao  FU Zhi_Qiang  FENG Xin_Gang  LIU Jin_Ming  SHI Yao_Jun  YUAN Chun_Xiu  CAI You_Min and LIN Jiao_Jiao
Institution:Shanghai Veterinary Research Institute of CAAS, National Laboratory of Animal Schistosomiasis Contronl, Key Laboratory of Animal Parasitology Ministry of Agriculture, Shanghai 200232, China;Shanghai Veterinary Research Institute of CAAS, National Laboratory of Animal Schistosomiasis Contronl, Key Laboratory of Animal Parasitology Ministry of Agriculture, Shanghai 200232, China;Shanghai Veterinary Research Institute of CAAS, National Laboratory of Animal Schistosomiasis Contronl, Key Laboratory of Animal Parasitology Ministry of Agriculture, Shanghai 200232, China;Shanghai Veterinary Research Institute of CAAS, National Laboratory of Animal Schistosomiasis Contronl, Key Laboratory of Animal Parasitology Ministry of Agriculture, Shanghai 200232, China;Shanghai Veterinary Research Institute of CAAS, National Laboratory of Animal Schistosomiasis Contronl, Key Laboratory of Animal Parasitology Ministry of Agriculture, Shanghai 200232, China;Shanghai Veterinary Research Institute of CAAS, National Laboratory of Animal Schistosomiasis Contronl, Key Laboratory of Animal Parasitology Ministry of Agriculture, Shanghai 200232, China;Shanghai Veterinary Research Institute of CAAS, National Laboratory of Animal Schistosomiasis Contronl, Key Laboratory of Animal Parasitology Ministry of Agriculture, Shanghai 200232, China;Shanghai Veterinary Research Institute of CAAS, National Laboratory of Animal Schistosomiasis Contronl, Key Laboratory of Animal Parasitology Ministry of Agriculture, Shanghai 200232, China;Shanghai Veterinary Research Institute of CAAS, National Laboratory of Animal Schistosomiasis Contronl, Key Laboratory of Animal Parasitology Ministry of Agriculture, Shanghai 200232, China
Abstract:
Keywords:Schistosoma japonicum  signal transduction  Wnt4  development  differential express
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